Oszacowano, że 90% wszystkich czynników rakotwórczych to również mutageny. Test Amesa, pierwotnie opracowany przez Dr. Bruce Ames i jego współpracowników, wykorzystuje zmodyfikowane bakterie wrażliwe na czynniki mutagenne w celu oceny zdolności związków do powodowania bezpośrednich mutacji DNA. Odwrotne zdarzenia mutacyjne powodują, że bakterie powracają do stanu protroficznego oraz rosną na podłożach ubogich w wybrane składniki odżywcze. Badanie to jest nazywane badaniem mutagenności Salmonella Ames Salmonella/mikrosomów (badanie Salmonella; badanie Ames), zostało wykorzystane w celu potwierdzenia mechanizmów mutagennych dla kilku znanych czynników rakotwórczych oraz wykorzystane w celu odkrycia nowych, wcześniej nieznanych czynników rakotwórczych w produktach konsumenckich. Żywności i Leków (FDA) wykorzystuje obecnie test Amesa do badania wielu substancji chemicznych szybko i tanio. Te nieliczne substancje chemiczne, które wydają się być mutagenne w badaniu Amesa są dalej badane na zwierzętach w celu oceny ich rakotwórczej siły działania.
Wiele różnych szczepów testerów składających się zarówno z Salmonella typhimurium oraz Escherichia coli zostało opracowanych do wykorzystania w badaniu Amesa, które wykrywają szczególne rodzaje mutacji, takie jak mutacje pary zasad lub mutacje typu frameshift oraz są bardziej czułe w odniesieniu do szczególnych czynników. Ulepszenia w badaniu zwiększyły podatność szczepu na wprowadzanie związków, wprowadziły wadliwe mechanizmy naprawy DNA oraz nadały zdolności bioaktywacji metabolicznej. Pierwotna metoda „pour plate” została również w znacznym stopniu zastąpiona nowszą metodą „fluctuation assay”, która wykorzystuje ekspozycję na płyn, inkubację i etap odwrócenia oraz wykorzystuje kolorymetryczny wskaźnik pH do wykazania wzrostu bakterii. Te udoskonalenia przyczyniły się do obniżenia limitów wykrywalności, zwiększenia zakresu związków, które mogą być wykrywane, umożliwiły adaptacje o wysokiej wydajności i sprawiły, że testy są bardziej biologicznie istotne dla ludzi. EBPI oferuje wiele różnych opcji testów dla każdej z trzech metod zestawu opisanych poniżej, aby zapewnić sukces Państwa analizy mutacyjnej.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Zawiera 1 bakterię, odczynniki, kontrole i plastiki)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Zawiera 2 odczynniki bakteryjne, i plastiki)
5051S9 Enzymy aktywujące (zaprojektowane do testu Amesa)
Mikropłytkowa wersja tradycyjnego testu Amesa z „wylewaną płytką”. Zestaw Muta-ChromoPlateTM jest czuły i przyjazny dla użytkownika. Jest on powszechnie wykorzystywany do wykrywania potencjału mutagennego poszczególnych substancji chemicznych lub mieszanin substancji chemicznych w wodzie, ściekach, osadach, ekstraktach wodnych powietrza, nowych substancjach chemicznych, żywności, kosmetykach, środkach farmaceutycznych oraz wszelkich innych materiałach, które mogą być wprowadzone do roztworu wodnego lub mikrozawiesiny, tak aby mogły być pobrane przez szczep badany.
6041 Zestaw podstawowy Ames-384 ISO (Zawiera 1 bakterię, odczynniki, kontrole i plastiki)
6041-2BS Zestaw szczepów bakteryjnych Ames-384 ISO (Zawiera 2 odczynniki bakteryjne, Zestaw podstawowy Ames ISO jest wersją dobrze znanego „Testu Amesa”, która wykorzystuje 48-dołkowy format ekspozycji próbki na mikropłytce 384-dołkowej w celu zmniejszenia ilości stosowanych odczynników i tworzyw sztucznych. Procedura Ames ISO została opracowana w celu badania materiałów mutagennych w różnych źródłach, takich jak powietrze środowiskowe i próbki wody, żywność, produkty higieny osobistej oraz ścieki przemysłowe za pomocą próby fluktuacyjnej, która jest odmianą tradycyjnego „Testu Amesa”.
Metoda Ames ISO zapewnia badaczom wiarygodną metodę badawczą, która jest łatwa do skonfigurowania i przeprowadzenia, przystosowana do próbek w roztworze wodnym lub zawiesinie oraz wytwarza łatwo wykrywalny kolorymetryczny punkt końcowy po 2-3 dniach inkubacji w temperaturze 37 °C.
5041 Zestaw podstawowy Ames Modified ISO (Zawiera 1 bakterię, odczynniki, kontrole i plastiki)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (Zawiera 2 bakterie, odczynniki, kontrole i plastiki)
Ta metoda badania Ames jest modyfikacją testu fluktuacji Ames ISO. Szczepy bakteryjne są poddawane wstępnej ekspozycji na różne stężenia związków mutagennych z podłożem wzrostu w zawiesinie przez 100 minut. Każde rozcieńczenie jest przeprowadzane w trzech powtórzeniach.
Próbki są następnie przenoszone, mieszane z roztworem odwracającym oraz umieszczane na płytce 96-studzienkowej przy użyciu 48-studzienkowego formatu oceny. Próbki są inkubowane przez 2-3 dni, a liczba odwróconych kolonii (poszczególne dołki) jest liczona za pomocą analizy kolorymetrycznej.
Który test Amesa jest najlepszy do moich badań
Muta-ChromoPlate Ames Test
- Idealny do bezpośredniej oceny próbek środowiskowych
- Użycia edukacyjne do projektów w klasie (łatwy do wykonania)
- Format 96-dołkowy na płytkach 96-dołkowych. Więcej punktów końcowych/próbka może poprawić istotność
- Narażenie bakteryjne występuje podczas całego badania
- Niezwykle przyjazny dla użytkownika z minimalnymi krokami wymaganymi do uzyskania wyników
- Doskonały do badania materiałów lotnych
- Nie wymaga etapów wstępnej koncentracji, duże objętości próbek
- Wyniki bardziej czułe w porównaniu z testami inkorporacji na płytkach
Testy ISO i zmodyfikowane ISO Amesa
- Idealne do badań farmaceutycznych i odkryć nowych cząsteczek
- Format 48-dołkowy na płytkach 96- lub 384-dołkowych zmniejsza liczbę płytek wymaganych do opracowania wyników
- METODA WYSOKIEJ PRZEPUSTOWOŚCI! Wiele próbek lub poziomów rozcieńczenia może być badanych szybko
- Wymagane mniejsze rozmiary próbek
- Stężenie bakterii jest sprawdzane przez gęstość optyczną (zapewnia logiczną fazę wzrostu)
- Zmniejszona ilość potrzebnych tworzyw sztucznych i odczynników, mniej utylizacji
- Kwantyfikacja jest prosta, a punktacja testu jest szybka i łatwa
- Test jest bardziej czuły niż test inkorporacji na płytkach
- Wykorzystuje okres przedokres ekspozycji w celu zwiększenia absorpcji bakteryjnej
- Większa spójność stężenia ekspozycji podczas auksotroficznych faz wzrostu
Zestawy Testowe Amesa
EBPI oferuje szeroką gamę metod testowych Amesa dla badań i rozwoju, pobierania próbek środowiskowych i projektów odkrywania leków.
|
Muta-.ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Modified Ames ISO Test |
.