Leucocytes normaux

Les cinq grandes catégories de leucocytes chez les mammifères sont les neutrophiles, les éosinophiles, les basophiles, les lymphocytes et les monocytes. Les trois premiers sont collectivement appelés granulocytes, car ils contiennent des granules dans leur cytoplasme, et les deux derniers sont collectivement appelés cellules mononucléaires en référence à leurs noyaux ronds. Ces termes collectifs sont quelque peu trompeurs car certains granulocytes ont des granules à peine perceptibles et la plupart des monocytes n’ont pas de noyau rond. Les granulocytes de la plupart des mammifères sont classés en neutrophiles, éosinophiles et basophiles en fonction de la réaction de leurs granules spécifiques avec les colorants des colorations sanguines polychromes, appelées colorations de Romanowsky.

L’espèce prototype pour la classification des granulocytes est l’homme, chez qui les granules des neutrophiles sont petits et roses avec une faible affinité pour les complexes azurés, les granules des basophiles sont d’un violet profond en raison d’une forte affinité pour les complexes azurés, et les éosinophiles sont intensément orange en raison d’une forte fixation de l’éosine. La classification des granulocytes dans les espèces animales est basée en partie sur l’homologie d’apparence avec les granulocytes humains et en partie sur la démonstration de l’homologie du contenu et de la fonction enzymatique.

Il existe de nombreuses différences, certaines subtiles et d’autres évidentes, entre les espèces et au sein des espèces.

Nectrophiles matures

Synonymes : Cellule polymorphonucléaire (PMN), neutrophiles segmentés

Le neutrophile segmenté, ou l’hétérophile chez les oiseaux, les reptiles et certains mammifères, est le granulocyte prédominant. Chez de nombreuses espèces, il est le leucocyte prédominant à l’état de santé. En général, seuls les neutrophiles matures sont libérés de la moelle pour circuler dans le sang. Comme les neutrophiles matures du sang humain prototypique ont des noyaux segmentés en lobes de chromatine condensée reliés par des filaments, les neutrophiles matures sont appelés neutrophiles segmentés (« segs » ou « neuts »). Les neutrophiles matures de nombreuses espèces animales n’ont pas une disposition distincte des lobes et des filaments (ils ont des noyaux rétrécis ou des contours nucléaires irréguliers ou noueux), néanmoins, ils sont également appelés neutrophiles segmentés. Les neutrophiles font partie du système immunitaire inné et constituent la première ligne de défense (et sont essentiels) contre les agents pathogènes bactériens. Les neutrophiles ont une demi-vie courte – ils ne persistent que pendant 10 à 15 heures après avoir été libérés dans le sang périphérique (Carakostas et al 1981). Lorsque l’on analyse le sang, on n’échantillonne que le pool de neutrophiles circulants et non le pool de marginalisation ou de réserve dans la moelle. Chez la plupart des espèces, à l’exception des chats, le rapport entre le pool circulant et le pool marginant est de 1:1 (Carakostas et al 1981) (il est estimé à 3:1 chez les chevaux). La libération de neutrophiles du pool de marginalisation se produit en réponse aux corticostéroïdes (endogènes ou exogènes), qui régulent à la baisse les molécules d’adhésion responsables de la marginalisation (ou patrouille de l’endothélium via le roulement médié par la sélectine) et a le potentiel de doubler le nombre de neutrophiles matures (leucogramme dit « de stress »).

Nutrophiles immatures

Chez certains animaux, des neutrophiles immatures peuvent être observés dans le sang périphérique et leur présence est appelée un décalage vers la gauche. La présence d’un nombre accru de neutrophiles immatures (c’est-à-dire supérieur à l’intervalle de référence établi pour cette espèce) indique généralement une réponse aux cytokines inflammatoires et un leucogramme inflammatoire. Le type le plus courant de neutrophile immature observé dans le sang est le neutrophile en bande, qui est un stade moins mature que le neutrophile segmenté. Les neutrophiles en bande se distinguent des neutrophiles matures par la forme de leur noyau, qui n’a pas la segmentation claire (un segment est défini comme une constriction de >50% de la largeur du noyau) et le contour irrégulier du neutrophile mature. Dans certaines situations, des stades antérieurs aux bandes sont libérés (par exemple, les métamyélocytes ; voir ci-dessous). Un glissement vers la gauche est généralement (mais pas toujours) accompagné d’un changement toxique (le changement toxique peut ne pas être observé s’il y a un léger glissement vers la gauche ou s’il n’y a que la libération de cellules immatures de la moelle sans maturation accélérée). Cependant, les neutrophiles immatures peuvent également être libérés prématurément dans les troubles de la moelle osseuse, tels que la leucémie ou les lésions graves de la moelle osseuse (les neutrophiles immatures ne sont généralement pas toxiques dans ce contexte non plus).

Les neutrophiles immatures sont classés en fonction de leur stade de maturation. Le précurseur spécifique du neutrophile le plus tôt identifiable est un myélocyte, qui se différencie en un métamyélocyte, puis en un neutrophile en bande, et enfin en un neutrophile segmenté mature. Seul le myélocyte est capable de se diviser – tous les stades plus matures (métamyélocyte, bande, neutrophile segmenté) sont incapables de se diviser (post-mitotiques). Le principal critère pour différencier les neutrophiles immatures les uns des autres est la forme de leur noyau, qui commence à s’indenter ou à se rétrécir au fur et à mesure que la cellule mûrit. Un myélocyte a un noyau rond, un métamyélocyte a un noyau indenté ou en forme de haricot et une bande a un noyau en forme de fer à cheval ou à côtés parallèles (pour une image compilée des neutrophiles immatures, veuillez vous référer aux pages de changement à gauche ou de changement toxique). Il est important de distinguer les neutrophiles immatures des monocytes, en particulier chez le chien où ces cellules peuvent se ressembler (voir monocyte ci-dessous). Pour ce faire, il faut regarder toutes les caractéristiques de la cellule (chromatine nucléaire, forme du noyau, emplacement du noyau dans la cellule, couleur du cytoplasme, bordures cytoplasmiques, présence ou absence de vacuoles et de granules) de concert (voir image à droite).

Lorsqu’on effectue une numération cellulaire différentielle, on classe les neutrophiles dans la catégorie « segmentée » si le noyau présente des régions nettement rétrécies (plus de 50% de la largeur du noyau) ou présente des saillies latérales entraînant des marges nucléaires irrégulières. Une cellule dont les marges nucléaires sont lisses et parallèles (ou presque parallèles) est un neutrophile « en bande » et doit être comptée comme telle. Les stades plus immatures sont classés selon leur forme nucléaire, comme décrit ci-dessus. Notez que des cellules situées entre ces stades bien définis seront toujours observées dans le sang. Dans ces circonstances, la cellule en question sera placée dans la catégorie la plus mature, c’est-à-dire qu’une cellule présentant des caractéristiques nucléaires à mi-chemin entre une bande et un neutrophile segmenté sera appelée neutrophile segmenté. Les neutrophiles plus immatures peuvent être comptés séparément dans leur catégorie spécifique ou regroupés en tant que neutrophiles « en bande ». À l’université Cornell, tous les neutrophiles immatures (neutrophiles en bande, métamyélocytes et myélocytes) sont regroupés dans la catégorie « bande » de notre comptage cellulaire différentiel. En utilisant l’image ci-dessus comme exemple, les cellules B à D seraient comptées comme des « bandes » et seule la cellule A serait comptée comme un neutrophile « segmenté ». Cependant, si nous observons des stades moins matures qu’un neutrophile en bande (métamyélocyte ou myélocyte), nous fournissons cette information dans les résultats (par exemple, le décalage vers la gauche s’étend aux myélocytes). La présence de ces stades plus immatures indique généralement une inflammation plus sévère que la présence de neutrophiles en bande seuls.

Eosinophiles

Les granules des éosinophiles chez la plupart des animaux sont orange mais il y a toujours des exceptions, notamment chez les exotiques. Les granules des éosinophiles des iguanes et de certains oiseaux sont en fait bleu pâle. En général, les noyaux des éosinophiles matures sont plus courts et moins segmentés que ceux des neutrophiles et le cytoplasme, s’il est visible, est bleu pâle. Il existe une variation marquée entre les espèces en ce qui concerne le nombre, la taille et la forme des granules d’éosinophiles.

La plus grande variation intraspécifique se trouve chez les éosinophiles de chien. Une variation marquée de la taille, du nombre et de la forme des granules se produit au sein et entre les individus de n’importe quelle race. Une variante morphologique spécifique et prévisible de l’éosinophile est observée chez les lévriers, d’autres lévriers (par exemple, les Whippets, les Deerhounds) et chez certains Golden Retrievers. Les éosinophiles de ces races n’ont pas de granules visibles et apparaissent comme des cellules avec des noyaux légèrement segmentés, un cytoplasme gris et des vacuoles. Ils sont parfois confondus avec des neutrophiles ou des monocytes toxiques et sont appelés éosinophiles  » vacuolés  » ou  » gris  » (voir les images représentatives de ces éosinophiles dans la galerie de sang de chien sous l’album hématologie). Sur l’analyseur d’hématologie ADVIA, ils dérivent vers la porte des monocytes (contiennent moins de peroxydase que les neutrophiles ou les éosinophiles granulés normaux).

Basophiles

Les basophiles prototypiques du sang humain sont remplis de petits granules ronds de couleur violet foncé. On trouve des basophiles similaires chez les chevaux, les camélidés et les ruminants. Ces cellules contiennent de nombreux petits granules violet foncé qui masquent le noyau dans de nombreuses cellules. Certains basophiles ont peu de granules, ce qui est probablement le résultat d’une dégranulation dans l’échantillon. On trouve couramment un faible nombre de basophiles dans le sang des bovins et des chevaux sains, mais moins dans celui des camélidés.

Les basophiles canins sont difficiles à reconnaître car beaucoup n’ont pas de granules facilement apparents. Ceci est dû au fait que les granules sont de couleur lavande pâle plutôt que violette. Les principales caractéristiques d’identification des basophiles canins sont le noyau long et plié, décrit comme « en forme de ruban », et la teinte inhabituelle grise à lavande du cytoplasme. Certains basophiles contiennent quelques granules violets clairs évidents (les granules sont plus faciles à voir dans les cellules qui sont rompues). Les basophiles sont rares dans le sang des chiens en bonne santé. Les basophiles félins sont remplis de petits granules légèrement ovales, de couleur lavande pâle plutôt que violet foncé. Le noyau de beaucoup d’entre eux semble avoir des vacuoles, qui sont en fait des granules reposant sur la chromatine. Les basophiles sont rares dans le sang des chats en bonne santé.

Lymphocytes

La plupart des lymphocytes qui circulent chez les chiens sains, chats, camélidés et chevaux sont de petites cellules (matures) qui ont des noyaux ronds avec une chromatine lisse et dense et un petit bord de cytoplasme bleu clair. La chromatine est si dense parce qu’elle est principalement constituée d’hétérochromatine (la cellule ne transcrit pas activement l’ADN). Les lymphocytes doivent être distingués des globules rouges nucléés (voir ci-dessous). Certains lymphocytes, quelle que soit l’espèce, peuvent présenter une quantité accrue de cytoplasme bleu très clair ou incolore. Ils ne sont pas qualifiés de réactifs mais sont simplement considérés comme des « variantes » normales. Certains lymphocytes sont légèrement plus grands et présentent un motif chromatinien plus fin et plus lâche. Les lymphocytes que l’on trouve dans le sang des ruminants normaux sont d’apparence assez variable. Beaucoup sont des lymphocytes intermédiaires avec une chromatine peu agglomérée et un cytoplasme assez abondant. Tous les lymphocytes des frottis sanguins ne sont pas ronds. Certains sont déformés par les forces mécaniques qui leur sont appliquées pendant le frottis et d’autres sont moulés par le contact avec les globules rouges. Nous mesurons généralement les lymphocytes en fonction de la taille de leur noyau par rapport aux neutrophiles (qui ont la même taille dans toutes les espèces), comme le montre le tableau ci-dessous. En outre, les lymphocytes normaux doivent être différenciés des globules rouges nucléés, des lymphocytes réactifs et des cellules néoplasiques (qui peuvent être myéloïdes ou lymphoïdes). De plus amples informations à ce sujet sont données ci-dessous.

Taille des lymphocytes

Taille des lymphocytes	Taille du noyau par rapport à un neutrophile
Petite	Le noyau d’un lymphocyte peut tenir à l’intérieur d’un neutrophile
Intermédiaire	Le noyau d’un lymphocyte est de la même taille qu’un neutrophile
Grand	Le neutrophile peut tenir à l’intérieur du noyau.

Les autres lymphocytes que l’on peut observer dans le sang sont :

• Les lymphocytes « réactifs » sont associés à une réponse immunitaire. Ils peuvent varier en taille (petits à grands), mais ont une chromatine agglutinée (hétérochromatine) et généralement des quantités accrues de cytoplasme bleu plus profond qui est assez lisse. Certains peuvent avoir des vacuoles cytoplasmiques claires. Il est important de différencier les grands lymphocytes réactifs des « blastes » associés à une leucémie (voir ci-dessous). Nous utilisons diverses techniques pour les distinguer, notamment les caractéristiques cytologiques, les observations cliniques et les autres résultats de l’hémogramme. Les lymphocytes réactifs peuvent être observés chez n’importe quel animal, mais sont assez fréquents dans le sang des jeunes animaux, en particulier ceux qui ont été récemment vaccinés.
• Lymphocytes granuleux : Ils sont également présents en faible nombre chez les animaux sains (comprennent entre 1 et 10% de tous les lymphocytes). Les lymphocytes granulaires se distinguent par la présence de petits granules rouges rassemblés dans une zone du cytoplasme, généralement dans une indentation du noyau. Les lymphocytes granulaires sont soit des cellules T cytotoxiques, soit des cellules tueuses naturelles. Une augmentation du nombre de lymphocytes granulaires peut être observée dans des conditions réactives (par exemple, infection par Ehrlichia canis chez le chien, maladie rénale chronique chez le chien) ou dans le cadre d’une leucémie primaire (leucémie des lymphocytes granulaires).

Lymphocytes vs globules rouges nucléés

Les nRBCs de stade très tardif, comme le métarubricule, se distinguent des lymphocytes par leur cytoplasme polychromatophile et leurs noyaux pyknotiques. Les stades plus précoces, comme le rubricyte basophile, bien que plus problématiques, ont un cytoplasme bleu plus profond et un motif chromatinien plus grossièrement condensé par rapport au lymphocyte.

Le contexte global du frottis peut également être pris en compte ; par exemple, on s’attendrait à ce que les nRBCs accompagnent une polychromasie marquée (réponse régénérative). Ceci n’est pas vrai chez les camélidés et les chats, où les nRBC sont fréquemment observés dans le sang dans diverses situations, et pas seulement dans les anémies régénératives.

Lymphocytes réactifs contre blastes

Il est important de distinguer les grandes cellules hématopoïétiques réactives des cellules néoplasiques (« blastes »). Ces dernières ne sont pas observées chez les animaux normaux mais uniquement chez les animaux atteints de néoplasie hématopoïétique (leucémie aiguë, lymphome avec une phase leucémique ou rarement dans le syndrome myélodysplasique). Il convient de noter que la différenciation des lymphocytes réactifs des « blastes » leucémiques peut être très difficile chez les animaux présentant un faible nombre de cellules problématiques, dites « grandes bleues ». La présence de cellules néoplasiques indique une leucémie, tandis que les lymphocytes réactifs indiquent une stimulation antigénique (significations très différentes). La raison pour laquelle nous appelons les cellules « blastes » est que nous ne pouvons pas déterminer de manière concluante leur lignée par leurs caractéristiques morphologiques ; d’autres outils, comme l’immunophénotypage et la coloration cytochimique, sont nécessaires. Pour plus d’informations sur la façon dont nous distinguons ces deux types très différents de leucocytes dans le sang (réactifs ou néoplasiques), reportez-vous à la page sur les cellules « grand bleu ».

Monocytes

Les monocytes sont les leucocytes les plus problématiques pour l’identification, car ils peuvent être assez variables en taille et en apparence. Ils sont souvent plus grands que les neutrophiles et sont généralement le plus grand leucocyte, mais il n’y a pas de différences constantes entre les espèces. Le noyau peut être rond, réniforme ou pseudo-lobulé (peut imiter un neutrophile). Il peut même parfois avoir la forme d’une bande, surtout chez les chiens, et peut être confondu avec les neutrophiles en bande. Cependant, la chromatine des monocytes est moins dense que celle des neutrophiles, et est décrite comme étant en dentelle ou légèrement agglutinée. Le cytoplasme est généralement lisse et bleu-gris et peut contenir quelques vacuoles de taille variable, et occasionnellement quelques granules roses-rouges très fins. Certains, comme le monocyte équin, ressemblent à des lymphocytes. La texture du cytoplasme d’un monocyte est légèrement granuleuse ou grossière par rapport au cytoplasme des lymphocytes, qui est très lisse et vitreux.

Liens connexes

• Interprétation des changements dans le nombre de leucocytes individuels et présence de leucocytes anormaux dans le sang, par exemple mastocytes, histiocytes.
• Modèles de leucocytes : Leucocytose physiologique, leucogramme de stress, leucogramme inflammatoire, leucémie
• Caractéristiques morphologiques des nRBC et interprétation de l’augmentation du nombre dans le sang.
• Caractéristiques morphologiques des neutrophiles immatures
• Caractéristiques morphologiques du changement toxique des neutrophiles.
• Guide de test rapide : Guide rapide pour l’interprétation des changements dans les résultats des tests hématologiques
• Atlas : Pour les compilations d’images.