Un résultat positif à un test sérologique, la mise en évidence d’un antigène viral dans les tissus par immunohistochimie, ou la présence de séquences d’ARN viral amplifiables dans le sang ou les tissus, avec des antécédents compatibles de SPH, sont considérés comme un diagnostic de SPH.
Dossiers sérologiques
Au moment de l’épidémie de 1993 dans la région de Four Corners, des anticorps à réaction croisée contre les hantavirus précédemment connus (par ex, Hantaan, Seoul, Puumala, et Prospect Hill) ont été trouvés dans les sérums des phases aiguës et convalescentes de certains des premiers patients du SPH. Des tests basés sur des antigènes viraux spécifiques du SNV ont depuis été développés et sont maintenant largement utilisés pour le diagnostic de routine du SPH. Le CDC utilise un test immuno-enzymatique (ELISA) pour détecter les anticorps IgM contre le SNV et pour diagnostiquer les infections aiguës par d’autres hantavirus. Ce test est également disponible dans certains laboratoires de santé d’État.
Un test IgG est utilisé conjointement avec le test de capture des IgM. Les sérums en phase aiguë et convalescente doivent refléter une multiplication par quatre du titre d’anticorps IgG ou la présence d’IgM dans les sérums en phase aiguë pour permettre le diagnostic de la maladie hantavirale. Notez que le sérum en phase aiguë envoyé en tant qu’échantillon de diagnostic initial peut ne pas encore contenir d’IgG. Les anticorps IgG sont durables et les sérums des patients identifiés rétrospectivement semblent avoir conservé des anticorps pendant de nombreuses années. Le test ELISA SNV IgG a donc été utilisé dans des enquêtes sérologiques sur l’épidémiologie de la maladie et semble être approprié à cet effet. Les enquêtes sur des populations sélectionnées utilisant ce test ont confirmé que les infections par le virus ne sont pas courantes et que les infections légères ou inapparentes sont rares.
Un test Western blot utilisant des antigènes recombinants et des conjugués spécifiques d’isotype pour la différenciation IgM-IgG a également été développé et ses résultats sont généralement en accord avec ceux du format de capture d’IgM.
On utilise également un test rapide sur bandelette immunoblot (RIBA), un prototype de test expérimental pour identifier les anticorps sériques contre les protéines recombinantes et les peptides spécifiques du SNV et d’autres hantavirus.
La confirmation sérologique des infections hantavirales se fait traditionnellement avec des tests de plaques neutralisantes, qui ont été récemment décrits pour le SNV. Cependant, ces tests spécifiques ne sont pas non plus disponibles dans le commerce.
Isolation
L’isolement des hantavirus (voir ci-dessous) à partir de sources humaines est difficile, et les virus responsables du SPH ne semblent pas faire exception à cette règle. A ce jour, aucun isolat de virus de type SNV n’a été récupéré chez l’homme, et l’isolement du virus n’est donc pas à prendre en considération à des fins de diagnostic.
Immunohistochimie (IHC)
L’analyse IHC de tissus fixés au formol avec des anticorps monoclonaux et polyclonaux spécifiques peut être utilisée pour détecter les antigènes des hantavirus et s’est avérée être une méthode sensible pour la confirmation en laboratoire des infections hantavirales. L’IHC joue un rôle important dans le diagnostic du SPH chez les patients dont les échantillons de sérum et les tissus congelés ne sont pas disponibles pour les tests de diagnostic et dans l’évaluation rétrospective de la prévalence de la maladie dans une région géographique définie.