On estime que 90% de tous les agents cancérigènes sont également des agents mutagènes. Le test d’Ames, développé à l’origine par le Dr Bruce Ames et ses collègues, utilise des bactéries modifiées sensibles aux agents mutagènes pour évaluer la capacité d’un composé à provoquer des mutations directes de l’ADN. Les mutations inverses font que les bactéries reviennent à un état protrophique et se développent sur des milieux déficients en nutriments sélectionnés. Ce test, appelé test de mutagénicité de Salmonella Ames/microsome (test de Salmonella ; test d’Ames), a été utilisé pour confirmer les mécanismes mutagènes de plusieurs agents cancérigènes connus, et utilisé pour découvrir de nouveaux agents cancérigènes inconnus jusqu’alors dans des produits de consommation. La Food and Drug Administration (FDA) utilise désormais le test d’Ames pour dépister rapidement et à moindre coût de nombreux produits chimiques. Les quelques produits chimiques qui semblent être mutagènes par le test d’Ames sont testés plus avant sur des animaux pour évaluer leur pouvoir cancérigène.
De nombreuses souches de test différentes composées à la fois de Salmonella typhimurium et d’Escherichia coli ont été développées pour être utilisées dans le test d’Ames qui détectent des types de mutation spécifiques comme la paire de bases ou le décalage de cadre et sont plus sensibles pour des agents spécifiques. Les améliorations apportées au test ont permis d’accroître la sensibilité des souches à l’entrée des composés, d’introduire des mécanismes de réparation de l’ADN déficients et de conférer des capacités de bioactivation métabolique. La méthode originale de la plaque de coulée a également été largement remplacée par une méthode plus récente de test de fluctuation qui emploie une étape d’exposition, d’incubation et de réversion du liquide et utilise un indicateur de pH colorimétrique pour démontrer la croissance bactérienne. Ces améliorations ont été combinées pour abaisser les limites de détection, augmenter l’étendue des composés pouvant être détectés, permettre des adaptations à haut débit et rendre le test plus pertinent d’un point de vue biologique pour les humains. EBPI propose de nombreuses options de dosage pour chacune des trois méthodes du kit décrites ci-dessous afin de garantir le succès de votre analyse mutationnelle.
Kit de base Muta-ChromoPlate™
5051 Kit de base Muta-ChromoPlate (Contient 1 bactérie, des réactifs, des contrôles et des plastiques)
B5051 Kit de souche bactérienne Muta-ChromoPlate (Contient 2 réactifs bactériens, contrôles et plastiques)
5051S9 Enzymes d’activation (conçues pour le test d’Ames)
Une version en microplaque du test d’Ames traditionnel « en plaque versée ». Le kit Muta-ChromoPlateTM est sensible et facile à utiliser. Il est couramment utilisé pour détecter le potentiel mutagène de produits chimiques individuels ou de mélanges de produits chimiques dans l’eau, les eaux usées, les sédiments, les extraits aqueux de l’air, les nouveaux produits chimiques, les aliments, les cosmétiques, les produits pharmaceutiques et tout autre matériau qui peut être mis en solution aqueuse ou en micro-suspension, de manière à pouvoir être absorbé par la souche testée.
6041 Kit de base Ames-384 ISO (Contient 1 bactérie, des réactifs, des contrôles et des plastiques)
6041-2BS Kit de souche bactérienne Ames-384 ISO (Contient 2 réactifs bactériens, contrôles et plastiques)
Le kit de base Ames ISO est une verison de l’essai de fluctuation du célèbre « test d’Ames » qui utilise un format d’exposition d’échantillon de 48 puits sur une microplaque de 384 puits pour réduire les réactifs et les plastiques utilisés. La procédure ISO d’Ames a été développée pour tester les matériaux mutagènes dans une variété de sources comme les échantillons environnementaux d’air et d’eau, les aliments, les produits de soins personnels et les effluents industriels par le test de fluctuation qui est une variation du traditionnel « test d’Ames ».
La méthode ISO d’Ames fournit aux chercheurs une méthode de test fiable, facile à mettre en place et à exécuter, se prêtant aux échantillons en solution aqueuse ou en suspension et produisant un point final colorimétrique facilement détectable après 2-3 jours d’incubation à 37 °C.
5041 Kit de base ISO modifié d’Ames (contient 1 bactérie, des réactifs, des contrôles et des plastiques)
5041-2BS Kit de souches bactériennes ISO modifié d’Ames (contient 2 réactifs bactériens, des contrôles et des plastiques)
Cette méthode de test d’Ames est une modification du test de fluctuation ISO d’Ames. Les souches bactériennes sont pré-exposées à différentes concentrations des composés mutagènes avec un milieu de croissance en suspension pendant 100 minutes. Chaque dilution est effectuée en trois exemplaires.
Les échantillons sont ensuite transférés, mélangés avec une solution de réversion et plaqués sur une plaque à 96 puits tout en utilisant un format d’évaluation à 48 puits. Les échantillons sont incubés pendant 2 à 3 jours et le nombre de colonies révertantes (puits individuels) est compté par analyse colorimétrique.
Quel test d’Ames est le meilleur pour ma recherche
Test d’Ames sur plaque Muta-Chromo
- Idéal pour l’évaluation directe des échantillons environnementaux
- Utilisations éducatives pour les projets de classe (facile à préformer)
- Format de 96 puits sur des plaques de 96 puits. Plus de points finaux/échantillon peut améliorer la signification
- L’exposition bactérienne se produit tout au long du test
- Extrêmement convivial avec des étapes minimales requises pour obtenir des résultats
- Excellent pour tester les matériaux volatils
- Aucune étape de préconcentration requise, grands volumes d’échantillons utilisés
- Résultats plus sensibles par rapport aux essais d’incorporation sur plaque
Tests ISO et ISO modifié d’Ames
- Idéal pour les découvertes de produits pharmaceutiques et de nouvelles molécules
- Le format 48 puits dans des plaques de 96 ou 384 puits réduit les plaques requises pour le développement des résultats
- MÉTHODE À HAUT RENDEMENT ! De nombreux échantillons ou niveaux de dilution peuvent être testés rapidement
- Des échantillons de plus petite taille sont nécessaires
- La concentration bactérienne est vérifiée par la densité optique (assure la phase de croissance logarithmique)
- Réduction des plastiques et des réactifs nécessaires, moins d’élimination
- La quantification est simple et la notation du test est rapide et facile
- Le test est plus sensible que le test d’incorporation sur plaque
- Utilisation de la prépériode d’exposition pour améliorer l’absorption bactérienne
- Concentration d’exposition plus constante pendant les phases de croissance auxotrophique
Kits de test d’Ames
L’EPPI offre une grande variété de méthodes de test d’Ames pour la recherche et le développement, l’échantillonnage environnemental, et les projets de découverte de médicaments.
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Muta-…Kit ChromoPlate |
Test ISO d’Ames Format 384 puits |
Test ISO d’Ames modifié |
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