Man anslår, at 90 % af alle kræftfremkaldende stoffer også er mutagene stoffer. Ames-testen, der oprindeligt blev udviklet af Dr. Bruce Ames og hans kolleger, anvender modificerede bakterier, der er følsomme over for mutagene stoffer, til at vurdere en forbindelses evne til at forårsage direkte DNA-mutationer. Omvendte mutationsbegivenheder får bakterierne til at vende tilbage til en protrofisk tilstand og vokse på medier med mangel på udvalgte næringsstoffer. Denne test kaldes Salmonella Ames Salmonella/microsom mutagenicity assay (Salmonella-test; Ames-test) og er blevet anvendt til at bekræfte mutagene mekanismer for flere kendte kræftfremkaldende stoffer og til at opdage nye, tidligere ukendte kræftfremkaldende stoffer i forbrugerprodukter. Food and Drug Administration (FDA) anvender nu Ames-testen til at screene mange kemikalier hurtigt og billigt. De få kemikalier, der viser sig at være mutagene ved Ames-testen, testes yderligere på dyr for at vurdere deres kræftfremkaldende virkning.
Der er udviklet mange forskellige testerstammer bestående af både Salmonella typhimurium og Escherichia coli til brug i Ames-testen, som påviser specifikke mutationstyper som basepar eller frameshift og er mere følsomme over for specifikke stoffer. Forbedringer af testen har gjort stammerne mere modtagelige over for indtrængen af stoffer, indført mangelfulde DNA-reparationsmekanismer og givet metabolisk bioaktiveringsevne. Den oprindelige hældeplademetode er også i vid udstrækning blevet erstattet af en nyere fluktuationsassaymetode, som anvender en væskeeksponering, inkubation og reversionstrin og anvender en kolorimetrisk pH-indikator til at påvise bakterievækst. Disse forbedringer er blevet kombineret for at sænke detektionsgrænserne, øge bredden af forbindelser, der kan detekteres, muliggøre tilpasninger med høj gennemløbskapacitet og gøre assayet mere biologisk relevant for mennesker. EBPI tilbyder mange forskellige assaymuligheder for hver af de tre kitmetoder, der er beskrevet nedenfor, for at sikre, at din mutationsanalyse bliver en succes.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Indeholder 1 bakterie, reagenser, kontroller og plastik)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Indeholder 2 bakterielle reagenser, kontroller og plast)
5051S9 Aktiveringsenzymer (beregnet til Ames-testen)
En mikropladeudgave af den traditionelle “pour plate”-Ames-test. Muta-ChromoPlateTM-sættet er følsomt og brugervenligt. Det anvendes almindeligvis til at påvise det mutagene potentiale af individuelle kemikalier eller blandinger af kemikalier i vand, spildevand, sediment, vandige luftudtræk, nye kemikalier, fødevarer, kosmetik, lægemidler og ethvert andet materiale, der kan sættes i vandig opløsning eller mikrosuspension, således at det kan optages af teststammen.
6041 Ames-384 ISO Basic Kit (Indeholder 1 bakterie, reagenser, kontroller og plastik)
6041-2BS Ames-384 ISO Bakteriestamme Kit (Indeholder 2 bakterielle reagenser, kontroller og plastik)
Ames ISO Basic Kit er en fluktuationsassay verison af den velkendte “Ames-test”, som anvender et format med 48 brønde prøveeksponering på en 384-brønde mikroplade for at reducere brugen af reagenser og plastik. Ames ISO-proceduren blev udviklet til at teste mutagene materialer i en række forskellige kilder som f.eks. miljømæssige luft- og vandprøver, fødevarer, produkter til personlig pleje og industrielle spildevand ved hjælp af fluktuationsassayet, som er en variation af den traditionelle “Ames-test”.
Ames ISO-metoden giver forskerne en pålidelig testmetode, som er nem at opstille og udføre, som er egnet til prøver i vandig opløsning eller suspension og giver et let påviseligt kolorimetrisk endepunkt efter 2-3 dages inkubation ved 37 °C.
5041 Ames Modified ISO Basic Kit (Indeholder 1 bakterie, reagenser, kontroller og plast)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (Indeholder 2 bakterielle reagenser, kontroller og plast)
Denne Ames-testmetode er en modifikation af Ames ISO-fluktuationsassayet. Bakteriestammerne udsættes på forhånd for forskellige koncentrationer af de mutagene forbindelser med et vækstmedie i suspension i 100 minutter. Hver fortynding udføres i tre eksemplarer.
Prøverne overføres derefter, blandes med en reversionsopløsning og udplantes på en 96-hulsplade, mens der anvendes et 48-hulsevalueringsformat. Prøverne inkuberes i 2-3 dage, og antallet af reverterende kolonier (individuelle brønde) tælles ved kolorimetrisk analyse.
Hvilken Ames-test er bedst til min forskning
Muta-ChromoPlate Ames-test
- Ideal til direkte vurdering af miljøprøver
- Undervisningsbrug til projekter i klasseværelset (let at præformere)
- 96 brøndformat på 96 brøndplader. Flere endepunkter/prøve kan forbedre signifikansen
- Bakterieeksponering sker under hele assayet
- Ekstremt brugervenligt med minimale trin, der kræves for at opnå resultater
- Udmærket til test af flygtige materialer
- Ingen prækoncentreringstrin påkrævet, store prøvevolumener anvendes
- Mere følsomme resultater sammenlignet med pladeinkorporeringsassays
ISO- og modificerede ISO Ames-tests
- Ideal til farmaceutiske og nye molekyleopdagelser
- 48-well-format i 96- eller 384-well-plader reducerer antallet af plader, der kræves til resultatudvikling
- HØJE THROUGHPUT METHOD! Mange prøver eller fortyndingsniveauer kan testes hurtigt
- Mindre prøvestørrelser påkrævet
- Bakteriekoncentration kontrolleres ved optisk tæthed (sikrer log vækstfase)
- Reduceret brug af plastik og reagenser, mindre bortskaffelse
- Kvantificering er enkel, og testscoring er hurtig og nem
- Assayet er mere følsomt end plade-indkorporeringsassayet
- Udnytter pre-eksponeringsperiode for at forbedre bakterieoptagelsen
- Mere konsistent eksponeringskoncentration under auxotrofiske vækstfaser
Ames-testsæt
EBPI tilbyder et bredt udvalg af Ames-testmetoder til forskning og udvikling, miljøprøvetagning og projekter til opdagelse af lægemidler.
|
Muta-ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Modificeret Ames ISO Test |
