En förklaring av gränsvärden för screening och bekräftelse.
av Michelle Lach, MSIMC
Förberedande testning (dvs. inledande testning, screening), bekräftelse och gränsvärden är några av de komplexa aspekterna av drogtestning som ofta kan missförstås av personer utanför laboratoriemiljön. För att kasta mer ljus över ämnet ville vi bryta ner stegen i våra tester och förklara hur de motsvarar de resultat som vi skickar ut till våra kunder.
För att börja är det viktigt att förstå skillnaden mellan narkotikaklasser och droger, inklusive läkemedelsmetaboliter. Drogklasser är de övergripande grupper under vilka enskilda droger som är likartade till sin natur kategoriseras, och utgör därmed grunden för hur våra drogtestpaneler klassificeras (dvs. amfetamin, cannabinoider, opiater etc.) (Figur 1).
Inom en drogklass finns det droger och deras metaboliter (som bildas när en drog metaboliseras av kroppen). Vi testar för specifika droger och/eller drogmetaboliter som är mest användbara för att antyda intag eller exponering av missbrukssubstanser. Det finns till exempel många olika ämnen som hör till narkotikaklassen amfetamin, men vi testar endast för amfetamin, MDA, MDEA, MDMA och metamfetamin (figur 2). Samma sak gäller för cannabinoider, med långt över 100 enskilda föreningar som kan kategoriseras under den narkotikaklassen. Den viktigaste farmakologiskt aktiva ingrediensen i cannabisplantan är tetrahydrocannabinol (THC), så våra tester letar endast efter THC eller läkemedelsmetaboliten Carboxy THC.
Initial Testing and Results
Screening är processen där alla prover skickas genom högkänslig instrumentering som är snabb och effektiv för att avgöra om ett prov kan innehålla ämnen av intresse. Screeningprocessen testar kumulativt för många föreningar som faller inom de givna läkemedelsklasserna. De narkotikaklasser som screenas bestäms av de läkemedelspaneler som kunden valt för testning.
Om ett prov genomgår screeningprocessen och ingenting upptäcks, verifierar våra forskare för certifiering av negativitet de negativa resultaten och den negativa rapporten skickas ut. Detta är anledningen till att de negativa resultaten i allmänhet har en snabb genomströmningstid.
Om ett prov går igenom screeningprocessen och något upptäcks, betyder det att vi måste titta närmare för att se vad det är, men det betyder inte att det har testats positivt för någon specifik drog eller drogmetabolit ännu. Det betyder bara att provet inte testades negativt när det testades för många olika föreningar. Vid denna tidpunkt måste provet gå in för bekräftelsetestning.
Bekräftelsetestning och resultat
Som ackrediterat laboratorium för kriminalteknisk toxikologi är vi skyldiga att bekräfta alla resultat som vi rapporterar ut som positiva. För att utföra bekräftelsetestning analyseras en annan del från det ursprungliga provet med ett mer avancerat och specifikt instrument, men den här gången har vi på grund av screeningresultaten en uppfattning om vad vi måste leta efter och vilka droger vi ska ta hänsyn till. Bekräftelsetestning tar längre tid än screening eftersom instrumentet letar efter enskilda droger och drogmetaboliter. Bekräftelse av positiva resultat kan ta upp till 24-48 ytterligare timmar efter att screeningresultaten har slutförts.
Skyddsnivåer
Skyddsnivåer är de detektionströsklar för föreningar som ställs in på testinstrumentet.
För att använda cannabinoid-exemplet är vår screening-skyddsnivå för narkotikaklassen cannabinoider i ett hårprov 1 pg/mg. Om någon av de hundratals cannabinoiderna kumulativt registreras över denna gränsnivå, kommer provet att gå till bekräftelsetestning. Som tidigare nämnts söker vårt bekräftelseinstrument endast efter en av två specifika droger/drogmetaboliter som är av intresse när det gäller drogtester för intag eller exponering av cannabis, Carboxy THC (intag) och/eller THC (exponering). Alla andra cannabinoider som kan ha bidragit till att nå screening cutoff-nivåerna testas inte under bekräftelsen eftersom de för närvarande inte anses vara relevanta för att upptäcka intag eller exponering av cannabis.
Screening- och bekräftelse cutoff-nivåer orsakar ofta förvirring när det gäller testresultat. Vi får ofta frågan hur ett vanligt hårdrogtest kan bekräfta positivt för Carboxy THC vid, låt oss säga 0,15 pg/mg, när screening cutoff ligger långt över den gränsen på 1 pg/mg. Svaret är att screening- och bekräftelsetesterna är helt olika tester som använder olika instrument och tittar på olika saker. Gränsen för screening nåddes med flera cannabinoider som testades och som registrerades över gränsen för screeningtestet (1 pg/mg). När provet gick till separat bekräftelsetest (ett helt annat test från början till slut) mättes endast Carboxy THC, med andra gränsvärden (0,05 pg/mg). Detta innebär att av alla cannabinoider som registrerades i provet fanns det endast 0,15 pg/mg Carboxy THC i provet.
När vi använder cannabisexemplet specifikt för hårtestning är det viktigt att notera att vi har två distinkta tester för att upptäcka THC i ett hårprov. Även om screeningprocessen för båda testerna är densamma, skiljer sig testförberedelserna och bekräftelseprocesserna åt. Figurerna 3-6 illustrerar skillnaden i THC-detektion mellan de två testerna.
Hårdrogtest: Detta drogtest används oftast vid drogtestning av vuxna för cannabisanvändning (intag). Bekräftelseinstrumentet för detta test letar efter Carboxy THC, THC:s drogmetabolit. Förekomst av Carboxy THC tyder på intag eftersom den endast hittas om kroppen har metaboliserat THC.
Hårets exponeringstest (ChildGuard®): Hår har en porös yta så ämnen från miljön tenderar att fastna på den, vilket gör exponeringstest möjligt. Det här testet används oftast för minderåriga, eller personer som står under legal vårdnad, när deras miljöer anses vara osäkra på grund av ämnesexponering. Detta är ett test för intag och exponering och därför söker bekräftelsetestet efter både Carboxy THC och THC. Detta är ett särskilt test eftersom exponeringstestet, till skillnad från det vanliga hårdrogtestet, rapporterar ett bekräftat positivt resultat om THC eller Carboxy THC eller båda förekommer i provet. Detta är det enda hårdrogtestet som kan testa passiv drogexponering utan behov av intag. Det är fördelaktigt för donatorer som utsätts för skadliga miljöer, men som kanske eller kanske inte själva intar substanserna, även om oavsiktligt intag kan förekomma. Donatorer som tenderar att ofta stoppa händerna i munnen (yngre, utvecklingsstörda etc.) kan oavsiktligt få i sig substansrester från sin omgivning.
Figur 3 illustrerar ett screeningtest på ett hårprov för intag av cannabinoider. Man kan se att det finns många cannabinoider som upptäcks i provet som kan leda till att ett test behöver undersökas närmare med bekräftelsetest. Den kumulativa nivån av de cannabinoidföreningar som påvisas (THC, Carboxy, andra) skulle alla bidra till att nå gränsvärdet för screening (1 pg/mg). Om den påvisbara mängden föreningar i ett prov understiger gränsvärdet för screening, kommer provet att granskas och verifieras av en forskare med negativ certifiering och rapporteras som ett negativt resultat.
Figur 4 illustrerar det bekräftelsetest för intag som skulle följa på screeningtestet från provexemplet i figur 3 om den detekterbara mängden föreningar i narkotikaklassen cannabinoider överskrider screeninggränsen på 1 pg/mg. Eftersom detta är ett bekräftande test för intag kommer det endast att upptäcka de specifika nivåerna av Carboxy THC. Om nivåerna överskrider gränsvärdet för bekräftelse av Carboxy THC (0,05 pg/mg) kommer resultaten att granskas och verifieras av en positiv certifierande forskare och sedan rapporteras som ett bekräftat positivt resultat. Om nivåerna av Carboxy THC inte överskrider gränsvärdena för bekräftelse kommer resultaten att granskas och verifieras av en negativ certifierande forskare och rapporteras som ett negativt resultat.
Figur 5 liknar figur 3, men illustrerar screening av ett prov som tyder på miljöexponering, inte intag. Även om det saknas Carboxy THC skulle THC och andra cannabinoider bidra till de kumulativa nivåerna i provet.
Figur 6 illustrerar det bekräftelsetest som skulle följa på screeningtestet för THC-exponering för provexemplaret i figur 5. Återigen kommer du att märka avsaknaden av Carboxy THC i provet, detta beror på att THC inte har metaboliserats av donatorn, vilket i allmänhet tyder på miljöexponering. Bekräftelsetestet för miljöexponering skulle också upptäcka Carboxy THC om det finns.
Tekniker för screening och bekräftelse, liksom gränsvärdena, kan variera från ett prov till ett annat. Vi hoppas att en bättre förståelse för betydelsen av dessa element och deras funktioner inom drogtestområdet kan bidra till att bredda den övergripande kunskapen om hur olika provtester och drogpaneler kan användas för att få bästa möjliga resultat.
Michelle Lach, chefredaktör för Substance/NeoTox och marknadschef på USDTL, har arbetat inom drogtestbranschen i över fem år för att bidra till att ge allmänheten en bättre förståelse för avancerade drogtesttjänster, så att rätt tester och bästa resultat kan användas.