Omkring 90 % av alla cancerframkallande ämnen är också mutagena. Ames-testet, som ursprungligen utvecklades av dr Bruce Ames och hans kollegor, använder modifierade bakterier som är känsliga för mutagena ämnen för att bedöma ett ämnes förmåga att orsaka direkta DNA-mutationer. Omvända mutationer leder till att bakterierna återgår till ett protrofiskt tillstånd och växer på medier med brist på utvalda näringsämnen. Detta test kallas Salmonella Ames Salmonella/mikrosom mutagenicity assay (Salmonella-test; Ames-test) och har använts för att bekräfta mutagena mekanismer för flera kända cancerframkallande ämnen och för att upptäcka nya, tidigare okända cancerframkallande ämnen i konsumentprodukter. Food and Drug Administration (FDA) använder nu Ames-testet för att snabbt och billigt undersöka många kemikalier. De få kemikalier som verkar mutagena genom Ames-testet testas ytterligare på djur för att bedöma deras cancerframkallande potens.
Många olika teststammar bestående av både Salmonella typhimurium och Escherichia coli har utvecklats för användning i Ames-testet som upptäcker specifika mutationstyper, som baspar eller ramförskjutning, och som är mer känsliga för specifika ämnen. Förbättringar av testet har ökat stammarnas mottaglighet för inmatning av ämnen, infört bristfälliga DNA-reparationsmekanismer och gett metabolisk bioaktiveringsförmåga. Den ursprungliga hällplattemetoden har också till stor del ersatts av en nyare fluktuationsanalysmetod där man använder en vätskeexponering, inkubation och reversion och använder en kolorimetrisk pH-indikator för att påvisa bakterietillväxt. Dessa förbättringar har kombinerats för att sänka detektionsgränserna, öka antalet föreningar som kan detekteras, möjliggöra anpassningar med hög genomströmning och göra testet mer biologiskt relevant för människor. EBPI erbjuder många olika alternativ för analyser för var och en av de tre kitmetoderna som beskrivs nedan för att säkerställa att din mutationsanalys blir framgångsrik.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Innehåller 1 bakterie, reagenser, kontroller och plast)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Innehåller 2 bakteriella reagenser, kontroller och plast)
5051S9 Aktiveringsenzymer (utformade för Ames-testet)
En mikroplattversion av det traditionella Ames-testet med ”hällplatta”. Muta-ChromoPlateTM-kitet är känsligt och användarvänligt. Det används vanligen för att påvisa den mutagena potentialen hos enskilda kemikalier eller kemikalieblandningar i vatten, avloppsvatten, sediment, vattenextrakt från luft, nya kemikalier, livsmedel, kosmetika, läkemedel och alla andra material som kan sättas i vattenlösning eller mikrosuspension, så att det kan tas upp av teststammen.
6041 Ames-384 ISO Basic Kit (Innehåller 1 bakterie, reagenser, kontroller och plast)
6041-2BS Ames-384 ISO Bacterial Strain Kit (Innehåller 2 bakteriella reagenser, kontroller och plast)
Ames ISO Basic Kit är en variant av det välkända ”Ames-testet” som använder sig av ett 48-väggars provexponeringsformat på en 384-väggars mikroplatta för att minska användningen av reagens och plast. Ames ISO-förfarandet har utvecklats för att testa mutagena material i en mängd olika källor, t.ex. luft- och vattenprover i miljön, livsmedel, produkter för personlig vård och industriellt avloppsvatten, genom fluktuationsanalys som är en variant av det traditionella Ames-testet.
Ames ISO-metoden förser forskarna med en tillförlitlig testmetod som är lätt att installera och köra, som lämpar sig för prover i vattenlösning eller suspension och som ger en lätt påvisbar kolorimetrisk slutpunkt efter 2-3 dagars inkubation vid 37 °C.
5041 Ames Modified ISO Basic Kit (Innehåller 1 bakterie, reagenser, kontroller och plast)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (Innehåller 2 bakteriella reagenser, kontroller och plast)
Denna Ames-testmetod är en modifiering av Ames ISO-fluktuationsanalys. Bakteriestammar förexponeras för olika koncentrationer av de mutagena föreningarna med ett tillväxtmedium i suspension i 100 minuter. Varje utspädning körs i tre exemplar.
Proverna överförs sedan, blandas med en reversionslösning och plottas ut på en 96-väggsplatta samtidigt som ett 48-väggs utvärderingsformat används. Proverna inkuberas i 2-3 dagar och antalet revertantkolonier (enskilda brunnar) räknas genom kolorimetrisk analys.
Vilket Ames-test är bäst för min forskning
Muta-ChromoPlate Ames-test
- Utmärkt för direkt bedömning av miljöprover
- Utbildningsanvändning för klassrumsprojekt (lätt att förforma)
- 96-brunnsformat på 96-brunnsplattor. Fler slutpunkter/prov kan förbättra signifikansen
- Bakterieexponering sker under hela analysen
- Extremt användarvänligt med minimala steg som krävs för att erhålla resultat
- Utmärkt för att testa flyktiga material
- Ingen förkoncentreringssteg krävs, stora provvolymer används
- Mer känsliga resultat jämfört med plattinkorporationsanalyser
ISO- och modifierade ISO-Ames-tester
- Utmärkt för upptäckter av läkemedel och nya molekyler
- 48-brunnsformatet i 96- eller 384-brunnsplattor minskar antalet plåtar som krävs för utveckling av resultat
- Höggenomförandemetod! Många prover eller utspädningsnivåer kan testas snabbt
- Mindre provstorlekar krävs
- Bakteriekoncentrationen kontrolleras genom optisk densitet (säkerställer logaritmisk tillväxtfas)
- Reducerat antal plaster och reagenser som behövs, mindre avfallshantering
- Kvantifiering är enkel och testbedömningen är snabb och enkel
- Testet är känsligare än plattinkorporationsanalysen
- Användning av för-exponeringsperiod för att förbättra bakterieupptaget
- Mer konsekvent exponeringskoncentration under auxotrofa tillväxtfaser
Ames-testkit
EBPI erbjuder ett brett utbud av Ames-testmetoder för forskning och utveckling, miljöprovtagning och projekt för upptäckt av läkemedel.
|
Muta-ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Modifierat Ames ISO Test |
