Protocolli Protocolli di colorazione di Gram

Vedi il PDF

La colorazione di Gram, la procedura di colorazione più usata in batteriologia, è una procedura di colorazione complessa e differenziale. Attraverso una serie di fasi di colorazione e decolorazione, gli organismi del dominio Batteri vengono differenziati in base alla composizione della parete cellulare. I batteri Gram-positivi hanno pareti cellulari che contengono strati spessi di peptidoglicano (90% della parete cellulare). Questi si colorano di viola. I batteri Gram-negativi hanno pareti con strati sottili di peptidoglicano (10% della parete) e un alto contenuto di lipidi. Questi si colorano di rosa. Questa procedura di colorazione non è usata per gli Archei o gli Eucarioti in quanto entrambi mancano di peptidoglicano. L’esecuzione della colorazione di Gram su qualsiasi campione richiede quattro passi fondamentali che includono l’applicazione di una colorazione primaria (violetto di cristallo) ad uno striscio fissato a caldo, seguita dall’aggiunta di un mordente (iodio di Gram), una rapida decolorazione con alcool, acetone, o una miscela di alcool e acetone e, infine, una controcolorazione con safranina.