Spiegazione dei livelli di cutoff di screening e di conferma.
di Michelle Lach, MSIMC
I test preliminari (cioè i test iniziali, lo screening), la conferma e i livelli di cutoff sono alcune delle complessità dei test antidroga che spesso possono essere mal comprese da chi non fa parte del laboratorio. Per fare più luce sull’argomento, abbiamo voluto suddividere le fasi dei nostri test e spiegare come corrispondono ai risultati che inviamo ai nostri clienti.
Per iniziare, è importante capire la differenza tra classi di droghe e droghe, compresi i metaboliti delle droghe. Le classi di droghe sono i gruppi generali sotto i quali sono classificate le singole droghe simili in natura, e quindi sono la base di come sono classificati i nostri pannelli di test antidroga (cioè anfetamine, cannabinoidi, oppiacei, ecc.) (Figura 1).
In una classe di droga, ci sono droghe e i loro metaboliti (formati quando una droga viene metabolizzata dal corpo). Noi testiamo per droghe specifiche e/o metaboliti di droghe che sono più utili per implicare l’ingestione o l’esposizione di sostanze d’abuso. Per esempio, ci sono molte sostanze diverse che rientrano nella classe delle anfetamine, ma noi cerchiamo solo anfetamine, MDA, MDEA, MDMA e metanfetamine (Figura 2). Lo stesso vale per i cannabinoidi, con ben oltre 100 composti individuali che possono essere classificati sotto quella classe di droghe. Il principale ingrediente farmacologicamente attivo della pianta di cannabis è il tetraidrocannabinolo (THC), quindi i nostri test cercano solo il THC, o il metabolita della droga Carbossi THC.
Test iniziali e risultati
Lo screening è il processo di inviare tutti i campioni attraverso una strumentazione altamente sensibile che è veloce ed efficace per determinare se un campione potrebbe contenere sostanze di interesse. Il processo di screening testa cumulativamente molti composti che rientrano in determinate classi di droghe. Le classi di droghe esaminate sono determinate dai pannelli di droghe selezionati dal cliente per il test.
Se un campione passa attraverso il processo di screening e non viene rilevato nulla, i nostri scienziati certificatori negativi verificano i risultati negativi e il rapporto negativo viene inviato. Questo è il motivo per cui i risultati negativi hanno generalmente un tempo di consegna rapido.
Se un campione passa attraverso il processo di screening e viene rilevato qualcosa, significa che abbiamo bisogno di dare un’occhiata più da vicino per vedere di cosa si tratta, ma non significa che è risultato positivo per qualsiasi droga specifica o metabolita di droga ancora. Significa solo che il campione non è risultato negativo quando è stato testato per molti composti diversi. A questo punto, il campione deve essere sottoposto a test di conferma.
Test di conferma e risultati
Come laboratorio accreditato di tossicologia forense, siamo tenuti a confermare tutti i risultati che riportiamo come positivi. Per eseguire i test di conferma, un’altra porzione del campione originale viene analizzata da uno strumento più avanzato e specifico, ma questa volta, grazie ai risultati dello screening, abbiamo un’idea di cosa dobbiamo cercare e quali droghe considerare. Il test di conferma richiede più tempo per essere completato rispetto allo screening perché lo strumento sta cercando singole droghe e metaboliti di droga. La conferma dei risultati positivi può richiedere fino a 24-48 ore in più dopo il completamento dei risultati dello screening.
Livelli di cutoff
I livelli di cutoff sono le soglie di rilevamento per i composti che sono impostati sulla strumentazione di test.
Per usare l’esempio dei cannabinoidi, il nostro livello di cutoff di screening per la classe di droga cannabinoide in un campione di capelli è 1 pg/mg. Se una qualsiasi delle centinaia di cannabinoidi si registra cumulativamente al di sopra di questo livello di cutoff, il campione passerebbe al test di conferma. Come accennato in precedenza, la nostra strumentazione di conferma cerca solo una delle due droghe specifiche/metaboliti di droga che sono di interesse quando si tratta di test di droga per l’ingestione o l’esposizione alla cannabis, Carboxy THC (ingestione) e/o THC (esposizione). Tutti gli altri cannabinoidi che potrebbero aver contribuito a raggiungere i livelli di cutoff di screening non vengono testati durante la conferma poiché non sono attualmente considerati rilevanti per rilevare l’ingestione o l’esposizione alla cannabis.
I livelli di cutoff di screening e di conferma spesso causano confusione quando si tratta dei risultati dei test. Ci viene spesso chiesto come un normale test antidroga sui capelli possa confermare la positività al carbossido di THC a, diciamo, 0,15 pg/mg, quando il cutoff di screening è ben oltre quel limite di 1 pg/mg. La risposta è che i test di screening e di conferma sono test completamente diversi, che usano strumenti diversi, che guardano cose diverse. I livelli di cutoff di screening sono stati raggiunti con più cannabinoidi testati che sono stati registrati sopra il livello di cutoff del test di screening (1 pg/mg). Quando il campione è passato al test di conferma separato (un test completamente diverso dall’inizio alla fine) è stato misurato solo il THC carbossilico, con livelli di cutoff diversi (0,05 pg/mg). Questo significa che, di tutti i cannabinoidi registrati nel campione, c’erano solo 0,15 pg/mg di Carbossi THC nel campione.
Quando si usa l’esempio della cannabis specifico per il test dei capelli, è importante notare che abbiamo due test distinti per rilevare il THC in un campione di capelli. Sebbene il processo di screening per entrambi i test sia lo stesso, la preparazione del test e i processi di conferma sono diversi. Le figure 3-6 illustrano la differenza di rilevamento del THC tra i due test.
Hair Drug Test: Questo test antidroga è usato più frequentemente quando si testano gli adulti per l’uso di cannabis (ingestione). Lo strumento di conferma per questo test è alla ricerca di Carbossi THC, il metabolita del THC. La presenza di carbossi THC indica l’ingestione perché si trova solo se il corpo ha metabolizzato il THC.
Hair Exposure Test (ChildGuard®): I capelli hanno una superficie porosa, quindi le sostanze dell’ambiente tendono ad attaccarsi ad essi, rendendo possibile il test di esposizione. Questo test è usato più spesso per i minori, o per quelli sotto tutela legale, quando i loro ambienti sono ritenuti non sicuri a causa dell’esposizione a sostanze. Questo è un test per l’ingestione e l’esposizione e quindi il test di conferma sta cercando sia il carbossido di THC che il THC. Questo è un test speciale perché, a differenza del normale test antidroga dei capelli, il test di esposizione riporterà un positivo confermato se il THC o il Carbossido di THC, o entrambi sono presenti nel campione. Questo è l’unico test antidroga per capelli che può verificare l’esposizione passiva alla droga senza bisogno di ingestione. È vantaggioso per i donatori che sono esposti ad ambienti nocivi, ma possono o non possono essere ingerire le sostanze stesse, anche se l’ingestione accidentale può verificarsi. I donatori che tendono a mettere frequentemente le mani in bocca (giovani, disabili dello sviluppo, ecc.) possono accidentalmente ingerire residui di sostanze dal loro ambiente.
La figura 3 illustra un test di screening su un campione di capelli per l’ingestione di cannabinoidi. Si può vedere che ci sono numerosi cannabinoidi che vengono rilevati nel campione che potrebbero risultare in un test che necessita di uno sguardo più attento con test di conferma. Il livello cumulativo dei composti cannabinoidi rilevati (THC, Carbossilico, altro) contribuirebbe tutti a raggiungere il livello di cutoff per lo screening (1 pg/mg). Se la quantità rilevabile di composti in un campione scende al di sotto del livello di cutoff di screening, il campione sarà esaminato e verificato da uno scienziato certificatore negativo e segnalato come risultato negativo.
La Figura 4 illustra il test di conferma per l’ingestione che seguirebbe il test di screening dell’esempio di campione della Figura 3 se la quantità rilevabile di composti della classe di droghe cannabinoidi superasse il livello limite di screening di 1 pg/mg. Poiché questo è un test di conferma per l’ingestione, esso rileverà i livelli specifici del solo THC carbossilico. Se i livelli superano il livello limite di conferma del THC carbossilico (0,05 pg/mg), i risultati saranno esaminati e verificati da uno scienziato certificatore positivo e quindi riportati come risultati positivi confermati. Se i livelli di carbossido di THC non superano i livelli limite di conferma, i risultati saranno esaminati e verificati da uno scienziato certificatore negativo e riportati come risultati negativi.
La Figura 5 è simile alla Figura 3, ma illustra lo screening di un campione che indicherebbe l’esposizione ambientale, non l’ingestione. Anche se manca il THC carbossilico, il THC e altri cannabinoidi contribuirebbero ai livelli cumulativi nel campione.
La figura 6 illustra il test di conferma che seguirebbe il test di screening per l’esposizione al THC per l’esempio del campione della figura 5. Anche in questo caso, si noterà la mancanza di carbossi THC nel campione, questo perché il THC non è stato metabolizzato dal donatore, il che implica generalmente un’esposizione ambientale. Il test di conferma per l’esposizione ambientale rileverebbe anche il carbossi THC se presente.
Le tecniche di screening e di conferma, così come i livelli di cutoff possono variare da un campione all’altro. Speriamo che avere una migliore comprensione del significato di questi elementi e le loro funzioni all’interno del regno di test di droga può aiutare ad ampliare la conoscenza generale di come diversi campioni di test e pannelli di droga possono essere utilizzati per ottenere i migliori risultati.
Michelle Lach, caporedattore di Substance/NeoTox e Marketing Manager alla USDTL, ha lavorato nell’industria dei test antidroga per oltre 5 anni per aiutare a portare una migliore comprensione dei servizi avanzati di test antidroga al pubblico, in modo che possano essere utilizzati i test giusti e i migliori risultati.