Si stima che il 90% di tutti i cancerogeni siano anche mutageni. Il test di Ames, originariamente sviluppato dal Dr. Bruce Ames e dai suoi colleghi, utilizza batteri modificati sensibili agli agenti mutageni per valutare la capacità di un composto di causare mutazioni dirette del DNA. Gli eventi mutazionali inversi fanno sì che i batteri tornino a uno stato protrofico e crescano su supporti carenti di nutrienti selezionati. Questo test è chiamato test di mutagenicità della Salmonella Ames Salmonella/microsoma (test della Salmonella; test di Ames), è stato usato per confermare i meccanismi mutageni per diversi cancerogeni noti, e usato per scoprire nuovi cancerogeni precedentemente sconosciuti nei prodotti di consumo. La Food and Drug Administration (FDA) ora usa il test di Ames per esaminare molte sostanze chimiche in modo rapido ed economico. Quei pochi prodotti chimici che sembrano essere mutageni con il test di Ames sono testati ulteriormente negli animali per valutare la loro potenza cancerogena.
Molti ceppi diversi di tester composti sia da Salmonella typhimurium che da Escherichia coli sono stati sviluppati per l’uso nel test di Ames che rilevano tipi di mutazione specifici come la coppia di base o il frameshift e sono più sensibili per agenti specifici. I miglioramenti al test hanno aumentato la suscettibilità del ceppo all’ingresso del composto, introdotto meccanismi di riparazione del DNA carenti e conferito capacità di bioattivazione metabolica. Il metodo originale della piastra di versamento è stato anche ampiamente sostituito da un metodo più recente di saggio di fluttuazione che impiega una fase di esposizione, incubazione e reversione del liquido e utilizza un indicatore di pH colorimetrico per dimostrare la crescita batterica. Questi miglioramenti sono stati combinati per abbassare i limiti di rilevamento, aumentare l’ampiezza dei composti che possono essere rilevati, consentire adattamenti ad alta produttività e rendere il test più biologicamente rilevante per gli esseri umani. EBPI offre molte opzioni di test diverse per ciascuno dei tre metodi di kit descritti di seguito per garantire il successo della vostra analisi mutazionale.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Contiene 1 batterio, reagenti, controlli e plastica)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Contiene 2 reagenti batterici, controlli e plastiche)
5051S9 Enzimi di attivazione (progettato per il test di Ames)
Una versione su micropiastra del tradizionale test di Ames “a piastra versata”. Il kit Muta-ChromoPlateTM è sensibile e facile da usare. È comunemente usato per rilevare il potenziale mutageno di singole sostanze chimiche o miscele di sostanze chimiche in acqua, acque reflue, sedimenti, estratti acquosi dell’aria, nuove sostanze chimiche, alimenti, cosmetici, prodotti farmaceutici e qualsiasi altro materiale che può essere messo in soluzione acquosa o in micro-sospensione, in modo che possa essere assorbito dal ceppo di prova.
6041 Ames-384 ISO Basic Kit (Contiene 1 batterio, reagenti, controlli e plastica)
6041-2BS Ames-384 ISO Bacterial Strain Kit (Contiene 2 reagenti batterici, controlli e plastica)
Il kit Ames ISO Basic è una versione del test di fluttuazione del ben noto “Test di Ames” che utilizza un formato di esposizione del campione a 48 pozzetti su una micropiastra a 384 pozzetti per ridurre i reagenti e la plastica utilizzati. La procedura Ames ISO è stata sviluppata per testare materiali mutageni in una varietà di fonti come campioni ambientali di aria e acqua, alimenti, prodotti per la cura personale ed effluenti industriali attraverso il test di fluttuazione che è una variazione del tradizionale “Test di Ames”.
Il metodo Ames ISO fornisce ai ricercatori un metodo di prova affidabile che è facile da impostare ed eseguire, adatto a campioni in soluzione acquosa o sospensione e produce un endpoint colorimetrico facilmente rilevabile dopo 2-3 giorni di incubazione a 37 °C.
5041 Ames Modified ISO Basic Kit (contiene 1 batterio, reagenti, controlli e plastica)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (contiene 2 reagenti batterici, controlli e plastica)
Questo metodo di test Ames è una modifica del test di fluttuazione Ames ISO. I ceppi batterici sono pre-esposti a diverse concentrazioni dei composti mutageni con un mezzo di crescita in sospensione per 100 minuti. Ogni diluizione viene eseguita in triplicato.
I campioni vengono poi trasferiti, mescolati con una soluzione di inversione e piastrati su una piastra a 96 pozzetti utilizzando un formato di valutazione a 48 pozzetti. I campioni vengono incubati per 2-3 giorni e il numero di colonie revertanti (pozzetti individuali) viene contato tramite analisi colorimetrica.
Quale test di Ames è meglio per la mia ricerca
Muta-ChromoPlate Ames Test
- Ideale per la valutazione diretta di campioni ambientali
- Uso didattico per progetti in classe (facile da eseguire)
- Formato su piastre da 96 pozzetti. Più endpoint/campione può migliorare la significatività
- L’esposizione batterica avviene durante il test
- Estremamente facile da usare con passaggi minimi richiesti per ottenere risultati
- Eccellente per testare materiali volatili
- Nessun passaggio di preconcentrazione richiesto, grandi volumi di campione utilizzati
- Risultati più sensibili rispetto ai test di incorporazione su piastra
ISO e Modified ISO Ames Tests
- Ideale per scoperte farmaceutiche e nuove molecole
- Il formato 48 pozzetti in piastre da 96 o 384 pozzetti riduce le piastre necessarie per lo sviluppo dei risultati
- METODO AD ALTA PORTATA! Molti campioni o livelli di diluizione possono essere testati rapidamente
- Necessità di campioni più piccoli
- La concentrazione batterica è controllata dalla densità ottica (assicura la fase di crescita log)
- Riduzione della plastica e dei reagenti necessari, meno smaltimento
- La quantificazione è semplice e il punteggio del test è facile e veloce
- Il test è più sensibile del test di incorporazione su piastra
- Utilizza il periodo di preperiodo di esposizione per migliorare l’assorbimento batterico
- Concentrazione di esposizione più consistente durante le fasi di crescita auxotrofica
Kit per test Ames
EBPI offre un’ampia varietà di metodi di test Ames per la ricerca e lo sviluppo, campionamento ambientale e progetti di scoperta di farmaci.
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Muta-ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Modified Ames ISO Test |
