A becslések szerint a rákkeltő anyagok 90%-a mutagén is. Az Ames-teszt, amelyet eredetileg Dr. Bruce Ames és munkatársai fejlesztettek ki, a mutagén anyagokra érzékeny módosított baktériumokat használ a vegyületek közvetlen DNS-mutációt okozó képességének értékelésére. A fordított mutációs események hatására a baktériumok visszaalakulnak protrofikus állapotba, és kiválasztott tápanyagokban szegény táptalajon növekednek. Ezt a tesztet Salmonella Ames Salmonella/mikromoszóma mutagenicitás vizsgálatnak (Salmonella-teszt; Ames-teszt) nevezik, számos ismert rákkeltő anyag mutagén mechanizmusának igazolására használták, és új, korábban ismeretlen rákkeltő anyagok felfedezésére használták a fogyasztói termékekben. Az Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hivatal (FDA) ma már számos vegyi anyag gyors és olcsó szűrésére használja az Ames-tesztet. Azt a néhány vegyi anyagot, amely az Ames-teszt alapján mutagénnek tűnik, tovább vizsgálják állatokon, hogy felmérjék rákkeltő hatásukat.
Az Ames-tesztben való felhasználásra számos különböző, Salmonella typhimuriumból és Escherichia coliból álló tesztelő törzset fejlesztettek ki, amelyek specifikus mutációtípusokat, például bázispáros vagy frameshift mutációt észlelnek, és érzékenyebbek a specifikus szerekre. A teszt továbbfejlesztése növelte a törzsek érzékenységét a vegyületek bejutásával szemben, hiányos DNS-javító mechanizmusokat vezetett be, és metabolikus bioaktiválási képességeket biztosított. Az eredeti öntőlemezes módszert is nagyrészt felváltotta egy újabb fluktuációs vizsgálati módszer, amely folyékony expozíciót, inkubációs és reverziós lépést alkalmaz, és kolorimetrikus pH-indikátort használ a baktériumok növekedésének kimutatására. Ezek a fejlesztések együttesen csökkentették a kimutatási határokat, növelték a kimutatható vegyületek körét, lehetővé tették a nagy áteresztőképességű adaptációkat, és a vizsgálatot biológiailag relevánsabbá tették az emberek számára. Az EBPI számos különböző vizsgálati lehetőséget kínál az alább ismertetett három kit-módszer mindegyikéhez, hogy biztosítsa a mutációs elemzés sikerét.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Tartalmaz 1 baktériumot, reagenseket, kontrollokat és műanyagokat)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Tartalmaz 2 baktériumreagenseket, kontrollokat és műanyagokat)
5051S9 Aktiváló enzimek (az Ames-teszthez tervezve)
A hagyományos “öntőlapos” Ames-teszt mikrolemezes változata. A Muta-ChromoPlateTM Kit érzékeny és felhasználóbarát. Általában a vízben, szennyvízben, üledékben, levegő vizes kivonatokban, új vegyi anyagokban, élelmiszerekben, kozmetikumokban, gyógyszerekben és bármely más olyan anyagban lévő egyedi vegyi anyagok vagy vegyi anyagok keverékeinek mutagén potenciáljának kimutatására használják, amely vizes oldatba vagy mikroszuszpenzióba helyezhető úgy, hogy azt a teszt törzs felvehesse.
6041 Ames-384 ISO Basic Kit (1 baktériumot, reagenseket, kontrollokat és műanyagokat tartalmaz)
6041-2BS Ames-384 ISO Bacterial Strain Kit (2 baktériumreagenst tartalmaz, kontrollokat és műanyagokat)
Az Ames ISO Basic Kit a jól ismert “Ames-teszt” fluktuációs vizsgálatának változata, amely 48 lyukú mintaexpozíciós formátumot használ 384 lyukú mikrolemezen a reagens- és műanyagfelhasználás csökkentése érdekében. Az Ames ISO eljárást különböző forrásokban, például környezeti levegő- és vízmintákban, élelmiszerekben, testápolási termékekben és ipari szennyvízben található mutagén anyagok vizsgálatára fejlesztették ki a hagyományos “Ames-teszt” variációját jelentő fluktuációs próbával.
Az Ames ISO módszer megbízható vizsgálati módszert biztosít a kutatók számára, amely könnyen beállítható és lefuttatható, vizes oldatban vagy szuszpenzióban lévő mintákhoz alkalmazható, és 2-3 napos 37 °C-on történő inkubáció után könnyen detektálható kolorimetrikus végpontot eredményez.
5041 Ames Modified ISO Basic Kit (Tartalmaz 1 baktériumot, reagenseket, kontrollokat és műanyagokat)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (Tartalmaz 2 baktériumreagenseket, kontrollokat és műanyagokat)
Ez az Ames vizsgálati módszer az Ames ISO fluktuációs vizsgálat módosítását jelenti. A baktériumtörzseket a mutagén vegyületek különböző koncentrációinak szuszpenzióban lévő növekedési táptalajjal 100 percig előzetesen kitesszük a mutagén vegyületek különböző koncentrációinak. Minden hígítást három példányban futtatnak.
A mintákat ezután átviszik, reverziós oldattal keverik és 96 lyukú lemezre ültetik, miközben 48 lyukú kiértékelő formátumot használnak. A mintákat 2-3 napig inkubáljuk, és a reverzáns telepek számát (az egyes mélyedésekben) kolorimetriás elemzéssel megszámoljuk.
Melyik Ames-teszt a legjobb a kutatásomhoz
Muta-ChromoPlate Ames-teszt
- ideális környezeti minták közvetlen értékelésére
- oktatási célú felhasználás tantermi projektekhez (könnyen előállítható)
- 96 lyuk formátum 96 lyukú lemezeken. Több végpont/minta javíthatja a szignifikanciát
- A baktériumexpozíció a vizsgálat során végig fennáll
- Extrémen felhasználóbarát, minimális lépések szükségesek az eredményekhez
- Kiválóan alkalmas illékony anyagok vizsgálatára
- Nincs szükség előkoncentrálási lépésekre, nagy mintamennyiségek használata
- érzékenyebb eredmények a lemezbeépítéses vizsgálatokhoz képest
ISO és módosított ISO Ames tesztek
- Ideális gyógyszeripari és új molekulák felfedezéséhez
- 48 lyuk formátum 96 vagy 384 lyukú lemezekben csökkenti az eredmények fejlesztéséhez szükséges lemezek számát
- NAGY TELJESÍTMÉNYŰ MÓDSZER! Sok minta vagy hígítási szint gyorsan vizsgálható
- Kisebb mintaméretek szükségesek
- A baktériumkoncentráció ellenőrzése optikai sűrűséggel történik (biztosítja a log növekedési fázist)
- Minél kevesebb műanyag és reagens szükséges, kevesebb ártalmatlanítás
- A mennyiségi meghatározás egyszerű és a teszt pontozása gyors és könnyű
- A vizsgálat érzékenyebb, mint a lemezes inkorporációs vizsgálat
- Kihasználja az előzetesen elkészített teszteket
- Az előzetesen elkészített teszteket
- Kihasználja az előzetesen elkészített teszteket.expozíciós időszakot a baktériumok felvételének fokozására
- Egységesebb expozíciós koncentráció az auxotróf növekedési fázisok során
Ames tesztkészletek
AEBPI az Ames tesztmódszerek széles választékát kínálja a kutatás és fejlesztés számára, környezeti mintavételezéshez és gyógyszerkutatási projektekhez.
|
Muta-ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Módosított Ames ISO Test |
.