A szűrés és a megerősítés határértékeinek magyarázata.
Michelle Lach, MSIMC
A drogvizsgálat (azaz a kezdeti vizsgálat, a szűrés), a megerősítés és a határértékek a drogtesztelés néhány olyan komplexitása, amelyet a laboratóriumon kívüliek gyakran félreérthetnek. Hogy jobban megvilágítsuk a témát, szerettük volna lebontani a tesztelésünk lépéseit, és elmagyarázni, hogyan felelnek meg azoknak az eredményeknek, amelyeket elküldünk ügyfeleinknek.
Kezdésként fontos megérteni a különbséget a drogosztályok és a kábítószerek között, beleértve a kábítószer-metabolitokat is. A drogosztályok azok az átfogó csoportok, amelyek alá az egyes, hasonló természetű drogokat besorolják, és így ez az alapja annak, hogy a kábítószer-vizsgálati paneljeinket hogyan osztályozzuk (pl. amfetaminok, kannabinoidok, ópiátok stb.) (1. ábra).
Egy drogosztályon belül vannak drogok és azok metabolitjai (amelyek akkor keletkeznek, amikor egy drogot a szervezet metabolizál). Azokat a konkrét kábítószereket és/vagy kábítószer-metabolitokat vizsgáljuk, amelyek a leghasznosabbak a visszaélést okozó anyagok lenyelésének vagy expozíciójának feltételezésében. Például az amfetamin drogosztályba számos különböző anyag tartozik, de mi csak az amfetamint, az MDA-t, az MDEA-t, az MDMA-t és a metamfetamint vizsgáljuk (2. ábra). Ugyanez igaz a kannabinoidokra is, amelyeknél jóval több mint 100 egyedi vegyületet lehet ebbe a drogosztályba sorolni. A kannabisz növény fő farmakológiailag aktív összetevője a tetrahidrokannabinol (THC), ezért vizsgálatunk csak a THC-t, illetve a kábítószer metabolitját, a karboxi THC-t keresi.
Első vizsgálatok és eredmények
A szűrés az a folyamat, amelynek során minden mintát rendkívül érzékeny műszereken küldünk át, amelyek gyorsan és hatékonyan képesek meghatározni, hogy a minta tartalmazhat-e érdekes anyagokat. A szűrési folyamat kumulatív módon számos olyan vegyületet vizsgál, amelyek az adott gyógyszerosztályokba tartoznak. A kiszűrt drogosztályokat az ügyfél által vizsgálatra kiválasztott drogpanelek határozzák meg.
Ha egy minta átfut a szűrési folyamaton, és semmi sem mutatható ki, a negatív eredményt igazoló tudósaink ellenőrzik a negatív eredményt, és a negatív jelentést kiküldik. Ezért a negatív eredmények általában gyors átfutási idővel rendelkeznek.
Ha egy minta átfut a szűrési folyamaton, és valamit kimutatnak, az azt jelenti, hogy közelebbről meg kell vizsgálnunk, hogy mi az, de ez még nem jelenti azt, hogy a teszt pozitív lett volna egy adott kábítószerre vagy kábítószer-metabolitra. Ez csak azt jelenti, hogy a minta nem bizonyult negatívnak, amikor több különböző vegyületet vizsgáltak rajta. Ezen a ponton a mintát megerősítő vizsgálatnak kell alávetni.
Megerősítő vizsgálat és eredmények
Akkreditált törvényszéki toxikológiai laboratóriumként kötelesek vagyunk minden olyan eredményt megerősíteni, amelyet pozitívnak jelentünk. A megerősítő vizsgálat elvégzéséhez az eredeti minta egy másik részét egy fejlettebb és specifikusabb műszerrel elemezzük, de ezúttal a szűrési eredményeknek köszönhetően már van elképzelésünk arról, hogy mit kell keresnünk, és milyen kábítószereket kell figyelembe vennünk. A megerősítő vizsgálat hosszabb időt vesz igénybe, mint a szűrővizsgálat, mivel a műszer az egyes kábítószereket és kábítószer-metabolitokat keresi. A pozitív eredmények megerősítése a szűrési eredmények elkészülte után akár 24-48 további órát is igénybe vehet.
Határértékek
A határértékek a vizsgálóberendezésen beállított kimutatási küszöbértékek a vegyületek számára.
A kannabinoid példával élve, a hajmintában a kannabinoid drogosztályra vonatkozó szűrési határértékünk 1 pg/mg. Ha a több száz cannabinoid közül bármelyik halmozottan e határérték felett regisztrálódik, a minta megerősítő vizsgálatra kerül. Amint korábban említettük, a megerősítő műszereink csak a két konkrét kábítószer/drog-metabolit közül egyet keresnek, amelyek a kannabisz lenyelésének vagy expozíciójának kábítószer-vizsgálatakor érdekesek, a karboxi-THC-t (lenyelés) és/vagy a THC-t (expozíció). Bármely más kannabinoidot, amely hozzájárulhatott a szűrési határértékek eléréséhez, nem vizsgálnak a megerősítés során, mivel ezeket jelenleg nem tekintik relevánsnak a kannabisz lenyelésének vagy expozíciójának kimutatása szempontjából.
A szűrési és a megerősítési határértékek gyakran okoznak zavart a vizsgálati eredmények tekintetében. Gyakran kérdezik tőlünk, hogy egy szokásos hajdrog-teszt hogyan tud pozitívan megerősíteni karboxi THC-t mondjuk 0,15 pg/mg-nál, amikor a szűrési határérték jóval e határérték felett, 1 pg/mg-nál van. A válasz az, hogy a szűrő- és a megerősítő tesztek teljesen különböző tesztek, amelyek különböző eszközöket használnak, és különböző dolgokat vizsgálnak. A szűrési határértékeket úgy érték el, hogy több olyan kannabinoidot vizsgáltak, amelyek a szűrővizsgálati határérték (1 pg/mg) felett regisztráltak. Amikor a minta külön megerősítő vizsgálatra került (ez egy teljesen más vizsgálat az elejétől a végéig), csak a karboxi-THC-t mérték, más határértékekkel (0,05 pg/mg). Ez azt jelenti, hogy a mintában regisztrált összes kannabinoid közül csak 0,15 pg/mg Carboxy THC volt a mintában.
A hajvizsgálatra vonatkozó kannabiszos példát használva fontos megjegyezni, hogy két különböző tesztünk van a THC kimutatására egy hajmintában. Bár a két teszt szűrési folyamata azonos, a teszt előkészítési és megerősítési folyamatai különböznek. A 3-6. ábra szemlélteti a THC kimutatásának különbségét a két teszt között.
Hajdrog-teszt: Ezt a drogtesztet leggyakrabban akkor használják, amikor felnőtteket vizsgálnak kannabiszhasználatra (lenyelésre). Ennek a tesztnek a megerősítő eszköze a karboxi THC-t, a THC kábítószer-metabolitját keresi. A Carboxy THC jelenléte a lenyelésre utal, mivel csak akkor található meg, ha a szervezet metabolizálta a THC-t.
Haj expozíciós teszt (ChildGuard®): A haj porózus felületű, így a környezetből származó anyagok hajlamosak megtapadni rajta, ami lehetővé teszi az expozíció vizsgálatát. Ezt a tesztet leggyakrabban kiskorúak vagy törvényes gyámság alatt állók esetében alkalmazzák, amikor a környezetük feltételezhetően nem biztonságos az anyagoknak való kitettség miatt. Ez a vizsgálat a lenyelést és az expozíciót vizsgálja, ezért a megerősítő teszt mind a karboxi-THC-t, mind a THC-t keresi. Ez egy különleges teszt, mert a szokásos hajdrog-teszttel ellentétben az expozíciós teszt megerősített pozitív eredményt jelez, ha a mintában THC vagy karboxi THC, vagy mindkettő jelen van. Ez az egyetlen olyan hajdrog-teszt, amely a passzív kábítószer-expozíciót is vizsgálja, anélkül, hogy lenyelésre lenne szükség. Előnyös az olyan donorok számára, akik káros környezetnek vannak kitéve, de nem biztos, hogy maguk is lenyelik az anyagokat, bár véletlenszerű lenyelés előfordulhat. Azok a donorok, akik hajlamosak gyakran a szájukba venni a kezüket (fiatalabbak, fejlődésben akadályozottak stb.), véletlenül lenyelhetik a környezetükből származó anyagmaradványokat.
A 3. ábra egy hajmintán végzett szűrővizsgálatot szemléltet a kannabinoidok lenyelése szempontjából. Látható, hogy a mintában számos olyan kannabinoidot mutattak ki, amelyek miatt a vizsgálat megerősítő vizsgálattal történő közelebbi vizsgálatot igényelhet. A kimutatott kannabinoid vegyületek (THC, karboxi, egyéb) összesített szintje mind hozzájárulna a szűrés határértékének (1 pg/mg) eléréséhez. Ha egy mintában a kimutatható vegyületek mennyisége a szűrési határérték alá esik, a mintát egy negatív minősítő tudós felülvizsgálja és ellenőrzi, és negatív eredményként jelenti ki.
A 4. ábra a 3. ábrán bemutatott mintapélda alapján végzett szűrővizsgálatot követő, lenyelésre vonatkozó megerősítő vizsgálatot mutatja be, ha a kannabinoid kábítószer-osztályba tartozó vegyületek kimutatható mennyisége meghaladja az 1 pg/mg-os szűrési határértéket. Mivel ez egy lenyelésre vonatkozó megerősítő vizsgálat, csak a karboxi-THC specifikus szintjét fogja kimutatni. Ha a szintek meghaladják a karboxi-THC megerősítő határértéket (0,05 pg/mg), az eredményeket egy pozitív eredményt igazoló tudós felülvizsgálja és ellenőrzi, majd megerősített pozitív eredményként jelenti ki. Ha a karboxi-THC szintje nem haladja meg a megerősítő határértéket, az eredményeket a negatív hitelesítő tudós felülvizsgálja és ellenőrzi, majd negatív eredményként jelenti ki.
Az 5. ábra hasonló a 3. ábrához, de egy olyan minta szűrését szemlélteti, amely környezeti expozícióra utal, nem pedig lenyelésre. Bár a karboxi-THC hiányzik, a THC és más kannabinoidok hozzájárulnának a minta kumulatív szintjéhez.
A 6. ábra azt a megerősítő vizsgálatot szemlélteti, amely a THC-expozíció szűrővizsgálatát követné az 5. ábrán bemutatott minta esetében. Ismét feltűnik a karboxi THC hiánya a mintában, ez azért van, mert a donor nem metabolizálta a THC-t, ami általában környezeti expozíciót jelent. A környezeti expozíciót megerősítő teszt a karboxi-THC-t is kimutatja, ha jelen van.
A szűrési és megerősítési technikák, valamint a határértékek mintánként eltérőek lehetnek. Reméljük, hogy ezen elemek jelentőségének és a kábítószer-vizsgálatok területén betöltött funkcióiknak a jobb megértése segíthet kiszélesíteni az általános ismereteket arról, hogy a különböző mintatesztek és drogpanelek hogyan használhatók fel a legjobb eredmények elérése érdekében.
Michelle Lach, a Substance/NeoTox főszerkesztője és az USDTL marketing menedzsere több mint 5 éve dolgozik a drogtesztelési iparágban, hogy segítsen jobban megértetni a nyilvánossággal a fejlett drogtesztelési szolgáltatásokat, hogy a megfelelő teszteket és a legjobb eredményeket lehessen felhasználni.