Screening ja vahvistus raja-arvot selitetty.
Michelle Lach, MSIMC
Alkutestaus (eli alkutestaus, seulonta), vahvistus ja raja-arvot ovat joitakin huumausaineiden testauksen monimutkaisuuksista, jotka laboratorioympäristön ulkopuoliset henkilöt voivat usein ymmärtää väärin. Valaistaksemme aihetta tarkemmin halusimme eritellä testauksemme vaiheet ja selittää, miten ne vastaavat asiakkaillemme lähettämiämme tuloksia.
Aluksi on tärkeää ymmärtää huumausaineluokkien ja huumausaineiden, mukaan lukien huumausaineiden aineenvaihduntatuotteet, välinen ero. Huumausaineluokat ovat yleisiä ryhmiä, joiden alle yksittäiset, luonteeltaan samankaltaiset huumeet luokitellaan, ja näin ollen ne ovat perusta sille, miten huumetestauspaneelimme luokitellaan (eli amfetamiinit, kannabinoidit, opiaatit jne.) (kuva 1).
Huumausaineluokan sisällä on huumausaineita ja niiden aineenvaihduntatuotteita (jotka muodostuvat, kun elimistö metaboloi huumausainetta). Testaamme tiettyjä huumausaineita ja/tai huumausaineiden metaboliitteja, jotka ovat käyttökelpoisimpia väärinkäytettävien aineiden nauttimiseen tai altistumiseen viittaavissa testeissä. Esimerkiksi amfetamiinihuumeiden luokkaan kuuluu monia eri aineita, mutta testaamme vain amfetamiinia, MDA:ta, MDEA:ta, MDMA:ta ja metamfetamiinia (kuva 2). Sama pätee kannabinoideihin, joita on reilusti yli 100 yksittäistä yhdistettä, jotka voidaan luokitella tähän huumausaineluokkaan. Kannabiskasvin tärkein farmakologisesti aktiivinen ainesosa on tetrahydrokannabinoli (THC), joten testauksessamme etsitään vain THC:tä tai huumausaineen aineenvaihduntatuotetta karboksi THC:tä.
Alkutestaus ja tulokset
Screening on prosessi, jossa kaikki näytteet lähetetään erittäin herkän mittalaitteiston läpi, jonka avulla voidaan nopeasti ja tehokkaasti määritellä, voiko näyte sisältää kiinnostavia aineita. Seulontaprosessissa testataan kumulatiivisesti monia tiettyihin lääkeryhmiin kuuluvia yhdisteitä. Seulottavat huumausaineluokat määräytyvät asiakkaan testausta varten valitsemien huumausainepaneelien perusteella.
Jos näyte käy läpi seulontaprosessin eikä mitään löydy, negatiiviset tulokset varmentavat tutkijamme vahvistavat negatiiviset tulokset ja negatiivinen raportti lähetetään. Tämän vuoksi negatiivisten tulosten läpimenoaika on yleensä nopea.
Jos näyte käy läpi seulontaprosessin ja siinä havaitaan jotakin, se tarkoittaa, että meidän on tutkittava tarkemmin, mitä se on, mutta se ei tarkoita, että näyte olisi vielä positiivinen jollekin tietylle huumausaineelle tai huumausaineen metaboliitille. Se tarkoittaa vain sitä, että näyte ei ollut negatiivinen, kun sitä testattiin monien eri yhdisteiden osalta. Tässä vaiheessa näytteen on mentävä varmistustestiin.
Vahvistustestaus ja tulokset
Akreditoituna oikeuslääketieteellisen toksikologian laboratoriona meidän on vahvistettava kaikki positiivisiksi ilmoittamamme tulokset. Vahvistustestausta varten toinen osa alkuperäisestä näytteestä analysoidaan kehittyneemmällä ja spesifisemmällä laitteella, mutta tällä kertaa meillä on seulontatulosten ansiosta käsitys siitä, mitä meidän on etsittävä ja mitä huumausaineita on otettava huomioon. Vahvistustestaus kestää seulontaa kauemmin, koska laite etsii yksittäisiä huumausaineita ja niiden aineenvaihduntatuotteita. Positiivisten tulosten vahvistaminen voi kestää jopa 24-48 tuntia seulontatulosten valmistumisen jälkeen.
Kynnysarvot
Kynnysarvot ovat yhdisteiden havaitsemisrajat, jotka on asetettu testauslaitteistoon.
Käyttääkseni kannabinoidiesimerkkiä, seulontamme kynnysarvo kannabinoidien huumausaineluokalle hiusnäytteessä on 1 pg/mg. Jos jokin sadoista kannabinoideista ylittää kumulatiivisesti tämän raja-arvon, näyte menee vahvistustestiin. Kuten aiemmin mainittiin, vahvistuslaitteistomme etsii vain yhtä kahdesta erityisestä huumausaineesta/huumausaineen aineenvaihduntatuotteesta, jotka ovat kiinnostavia kannabiksen nauttimisen tai altistumisen huumetestauksessa: karboksi-THC (nauttiminen) ja/tai THC (altistuminen). Muita kannabinoideja, jotka ovat saattaneet vaikuttaa seulonnan raja-arvojen saavuttamiseen, ei testata vahvistuksen aikana, koska niitä ei tällä hetkellä pidetä merkityksellisinä kannabiksen nauttimisen tai altistumisen havaitsemisessa.
Seulonnan ja vahvistuksen raja-arvot aiheuttavat usein sekaannusta testaustulosten osalta. Meiltä kysytään usein, miten tavallinen hiusten huumepikatesti voi vahvistaa positiivisen tuloksen karboksi-THC:n osalta vaikkapa 0,15 pg/mg:n kohdalla, kun seulonnan raja-arvo on reilusti yli tämän rajan eli 1 pg/mg. Vastaus on, että seulonta- ja varmistustesti ovat täysin erilaisia testejä, joissa käytetään eri välineitä ja tutkitaan eri asioita. Seulonnan raja-arvot saavutettiin, kun testattiin useita kannabinoideja, jotka rekisteröitiin yli seulontatestin raja-arvon (1 pg/mg). Kun näyte siirrettiin erilliseen varmistustestiin (täysin erilainen testi alusta loppuun), mitattiin vain karboksi-THC:tä, jonka raja-arvot olivat erilaiset (0,05 pg/mg). Tämä tarkoittaa, että kaikista näytteessä rekisteröidyistä kannabinoideista näytteessä oli vain 0,15 pg/mg karboksi-THC:tä.
Käytettäessä hiustestaukseen liittyvää kannabiksen esimerkkiä on tärkeää huomata, että meillä on kaksi erilaista testiä THC:n havaitsemiseksi hiusnäytteestä. Vaikka molempien testien seulontaprosessi on sama, testin valmistelu- ja vahvistusprosessit eroavat toisistaan. Kuvat 3-6 havainnollistavat THC:n havaitsemisen eroja näiden kahden testin välillä.
Hiusten huumetesti: Tätä huumetestiä käytetään useimmiten aikuisten huumetestauksessa kannabiksen käytön (nielemisen) varalta. Tämän testin varmistuslaitteella etsitään karboksi-THC:tä, joka on THC:n huumausaineen metaboliitti. Karboksi-THC:n esiintyminen viittaa nauttimiseen, koska sitä esiintyy vain, jos elimistö on metaboloinut THC:n.
Hiusten altistumistesti (ChildGuard®): Hiuksissa on huokoinen pinta, joten ympäristön aineilla on taipumus tarttua niihin, mikä mahdollistaa altistumistestauksen. Tätä testiä käytetään useimmiten alaikäisille tai holhouksen alaisille henkilöille, kun heidän ympäristönsä arvellaan olevan vaarallinen aineille altistumisen vuoksi. Kyseessä on nielemisen ja altistumisen testaus, ja siksi vahvistustestissä etsitään sekä karboksi-THC:tä että THC:tä. Tämä on erityinen testi, sillä toisin kuin tavallisessa hiusten huumetestissä, altistustesti antaa positiivisen tuloksen, jos näytteessä on THC:tä tai karboksi-THC:tä tai molempia. Tämä on ainoa hiushuumetesti, jolla voidaan testata passiivinen huumeille altistuminen ilman nielemistä. Se on hyödyllinen luovuttajille, jotka altistuvat haitallisille ympäristöille, mutta jotka eivät välttämättä nauti aineita itse, vaikka vahingossa tapahtuvaa nauttimista voikin tapahtua. Luovuttajat, joilla on taipumus laittaa kätensä usein suuhunsa (nuoret, kehitysvammaiset jne.), voivat vahingossa niellä ympäristöstä peräisin olevia ainejäämiä.
Kuvassa 3 havainnollistetaan hiusnäytteestä tehtävää seulontatestiä kannabinoidien nauttimisen varalta. Voit nähdä, että näytteessä havaitaan lukuisia kannabinoideja, jotka voivat johtaa siihen, että testiä on tarkasteltava tarkemmin varmistustesteillä. Havaittujen kannabinoidiyhdisteiden (THC, karboksi, muut) kumulatiivinen taso vaikuttaisi osaltaan siihen, että seulonnan raja-arvo (1 pg/mg) saavutetaan. Jos näytteessä havaittavissa olevien yhdisteiden määrä jää alle seulonnan raja-arvon, näytteen tarkastaa ja varmentaa negatiivisen tuloksen varmentava tutkija, ja se ilmoitetaan negatiivisena tuloksena.
Kuvassa 4 esitetään kuvassa 3 esitetyn esimerkkinäytteen seulontatestiä seuraava nauttimisen varmistustesti, jos kannabinoidien huumausaineluokkaan kuuluvien yhdisteiden havaittavissa oleva määrä ylittää seulonnan raja-arvon (1 pg/mg). Koska kyseessä on nielemisen varmistustesti, siinä havaitaan ainoastaan karboksi-THC:n erityiset pitoisuudet. Jos pitoisuudet ylittävät karboksi-THC:n vahvistuksen raja-arvon (0,05 pg/mg), positiivisen tuloksen vahvistava tutkija tarkastaa ja varmentaa tulokset, minkä jälkeen ne ilmoitetaan vahvistettuna positiivisena tuloksena. Jos karboksi-THC-pitoisuudet eivät ylitä vahvistusraja-arvoja, negatiivinen varmentava tutkija tarkastaa ja todentaa tulokset, ja ne ilmoitetaan negatiivisina tuloksina.
Kuvio 5 on samankaltainen kuin kuvio 3, mutta siinä havainnollistetaan näytteen seulontaa, joka viittaa ympäristöaltistukseen, ei nielemiseen. Vaikka karboksi-THC puuttuu, THC ja muut kannabinoidit vaikuttavat näytteen kumulatiivisiin pitoisuuksiin.
Kuvassa 6 havainnollistetaan THC-altistumisen seulontatestiä seuraava varmistustesti kuvassa 5 esitetylle näytteelle. Huomaat jälleen, että näytteessä ei ole karboksi-THC:tä, mikä johtuu siitä, että luovuttaja ei ole metaboloinut THC:tä, mikä yleensä viittaa ympäristöaltistukseen. Ympäristöaltistuksen varmistustesti havaitsisi myös karboksi-THC:n, jos sitä esiintyy.
Screening- ja varmistustekniikat sekä raja-arvot voivat vaihdella näytteestä toiseen. Toivomme, että parempi ymmärrys näiden tekijöiden merkityksestä ja niiden tehtävistä huumausainetestauksessa voi auttaa laajentamaan yleistä tietämystä siitä, miten eri näytetestien ja huumausainepaneelien avulla voidaan saada parhaat tulokset.
Michelle Lach, Substance/NeoTox-lehden päätoimittaja ja USDTL:n markkinointipäällikkö, on työskennellyt huumausainetestausalalla yli viiden vuoden ajan auttaakseen yleisöä ymmärtämään paremmin kehittyneitä huumausainetestauspalveluita, jotta voidaan hyödyntää oikeita testejä ja parhaita tuloksia.