Cushingin oireyhtymän diagnoosi perustuu anamneesin, lääkärintarkastuksen ja laboratoriokokeiden tarkasteluun, jotka auttavat määrittämään liiallisen kortisolipitoisuuden. Usein lisämunuaisen tai aivolisäkkeen röntgentutkimukset ovat hyödyllisiä kasvainten paikantamisessa. Lisäksi vanhojen ja tuoreiden valokuvien vertailu tuo usein esiin Cushingin oireyhtymää sairastavien potilaiden kasvojen ja kehon ulkonäön muutokset. Ensimmäinen vaihe Cushingin taudin diagnosoinnissa on liiallisen kortisolin erityksen varmistaminen. Tämä diagnoosi on helpointa tehdä seuraavilla testeillä:
- Matalan annoksen deksametasonisuppressiotesti, jossa otetaan pieni annos kortisolia muistuttavaa lääkettä, deksametasonia (1 mg) kello 23.00 ja otetaan seuraavana aamuna verestä kortisolipitoisuus. Normaaleilla henkilöillä näissä näytteissä on tyypillisesti hyvin alhaiset kortisolipitoisuudet, mikä osoittaa, että ACTH:n eritys on tukahdutettu, kun taas Cushingin tautia sairastavilla potilailla kortisoli havaitaan helposti ja usein se on suurentunut.
- 24 tunnin virtsanäytteenotto kortisolipitoisuuksien mittaamista varten.
Kun Cushingin oireyhtymän diagnoosi on varmistettu, on selvitettävä, mistä ylimääräinen kortisoli johtuu. Lähde voi olla peräisin lisämunuaisen kasvaimesta, ACTH:ta tuottavasta kasvaimesta tai aivolisäkkeen ACTH:ta tuottavasta adenoomasta. Petrosal sinus -näytteenotto on testi, jota käytetään ACTH-erityksen lähteen erottamiseen, eikä sitä pitäisi koskaan tehdä ennen kuin Cushingin oireyhtymän diagnoosi on varmistettu.
Jos laboratoriokokeet viittaavat aivolisäkkeen adenoomaan Cushingin oireyhtymän syyksi, diagnoosin varmistamiseksi tehdään aivolisäkkeen magneettikuvaus (MRI).