Explicarea nivelurilor limită de screening și de confirmare.
de Michelle Lach, MSIMC
Testarea preliminară (adică testarea inițială, screening), confirmarea și nivelurile limită sunt unele dintre complexitățile testării drogurilor care pot fi adesea neînțelese de cei din afara laboratorului. Pentru a face mai multă lumină asupra subiectului, am vrut să defalcăm etapele testării noastre și să explicăm cum corespund acestea rezultatelor pe care le trimitem clienților noștri.
Pentru început, este important să înțelegem diferența dintre clasele de droguri și droguri, inclusiv metaboliții de droguri. Clasele de droguri sunt grupele generale sub care sunt clasificate drogurile individuale de natură similară și, prin urmare, stau la baza modului în care sunt clasificate panourile noastre de testare a drogurilor (de exemplu, amfetamine, canabinoide, opiacee etc.) (Figura 1).
În cadrul unei clase de droguri, există droguri și metaboliții acestora (formați atunci când un drog este metabolizat de organism). Noi testăm pentru droguri specifice și/sau metaboliți de droguri care sunt cele mai utile pentru a implica ingestia sau expunerea la substanțe de abuz. De exemplu, există multe substanțe diferite care se încadrează în clasa de droguri amfetamină, dar noi testăm doar amfetamina, MDA, MDEA, MDMA și metamfetamina (figura 2). Același lucru este valabil și pentru canabinoizi, cu mult peste 100 de compuși individuali care pot fi încadrați în această clasă de droguri. Principalul ingredient activ din punct de vedere farmacologic al plantei de canabis este tetrahidrocannabinolul (THC), astfel încât testele noastre caută doar THC sau metabolitul drogului Carboxy THC.
Testări inițiale și rezultate
Cercetarea este procesul de trimitere a tuturor specimenelor prin intermediul unor instrumente foarte sensibile, care sunt rapide și eficiente pentru a determina dacă un specimen ar putea conține substanțe de interes. Procesul de screening testează în mod cumulativ mulți compuși care se încadrează în clasele de medicamente date. Clasele de medicamente depistate sunt determinate de panourile de medicamente selectate de client pentru testare.
Dacă un specimen trece prin procesul de screening și nu se detectează nimic, cercetătorii noștri de certificare a rezultatelor negative verifică rezultatele negative și se trimite raportul negativ. Acesta este motivul pentru care rezultatele negative au, în general, un timp de răspuns rapid.
Dacă un specimen trece prin procesul de screening și se detectează ceva, înseamnă că trebuie să ne uităm mai atent pentru a vedea despre ce este vorba, dar nu înseamnă că a fost testat pozitiv pentru un anumit drog sau metabolit de drog încă. Înseamnă doar că proba nu a avut rezultate negative atunci când a fost testată pentru mai mulți compuși diferiți. În acest moment, proba trebuie să fie supusă testării de confirmare.
Testarea de confirmare și rezultatele
În calitate de laborator de toxicologie medico-legală acreditat, suntem obligați să confirmăm toate rezultatele pe care le raportăm ca fiind pozitive. Pentru a efectua testarea de confirmare, o altă porțiune din proba inițială este analizată cu un instrument mai avansat și mai specific, dar de data aceasta, datorită rezultatelor de screening, avem o idee despre ce trebuie să căutăm și ce droguri trebuie să luăm în considerare. Testarea de confirmare durează mai mult decât screening-ul, deoarece instrumentul caută droguri individuale și metaboliți de droguri. Confirmarea rezultatelor pozitive poate dura până la 24-48 de ore suplimentare după ce au fost finalizate rezultatele de screening.
Nivelurile limită
Nivelurile limită sunt pragurile de detecție pentru compuși care sunt setate pe instrumentarul de testare.
Pentru a folosi exemplul canabinoidelor, nivelul nostru limită de screening pentru clasa de droguri canabinoide într-o probă de păr este de 1 pg/mg. Dacă oricare dintre sutele de canabinoizi se înregistrează cumulativ peste acest nivel de cutoff, proba va intra în testul de confirmare. După cum s-a menționat anterior, instrumentarul nostru de confirmare caută doar unul dintre cei doi metaboliți specifici ai drogurilor/drogurilor care prezintă interes atunci când vine vorba de testarea antidrog pentru ingestia sau expunerea la canabis, Carboxy THC (ingestie) și/sau THC (expunere). Orice alți canabinoizi care ar fi putut contribui la atingerea nivelurilor limită de screening nu sunt testați în timpul confirmării, deoarece aceștia nu sunt considerați în prezent relevanți pentru detectarea ingestiei de canabis sau a expunerii la canabis.
Nivelurile limită de screening și de confirmare provoacă adesea confuzie atunci când vine vorba de rezultatele testelor. Suntem frecvent întrebați cum se poate ca un test de droguri obișnuit pentru păr să confirme pozitiv pentru Carboxy THC la, să zicem, 0,15 pg/mg, când pragul de screening este mult peste această limită, la 1 pg/mg. Răspunsul este că testele de depistare și de confirmare sunt teste complet diferite, folosind instrumente diferite, care analizează lucruri diferite. Nivelurile limită de depistare au fost atinse atunci când au fost testate mai multe canabinoide care s-au înregistrat peste nivelul limită al testului de depistare (1 pg/mg). Când proba a fost supusă unui test de confirmare separat (un test complet diferit de la început până la sfârșit), a fost măsurat doar Carboxy THC, cu niveluri limită diferite (0,05 pg/mg). Acest lucru înseamnă că, dintre toți canabinoizii înregistrați în probă, existau doar 0,15 pg/mg de Carboxy THC în probă.
Când folosim exemplul canabisului specific testelor de păr, este important de reținut că avem două teste distincte pentru a detecta THC într-o probă de păr. Deși procesul de screening pentru ambele teste este același, procesele de pregătire și confirmare a testului diferă. Figurile 3-6 ilustrează diferența de detectare a THC între cele două teste.
Test de droguri pe păr: Acest test de droguri este cel mai frecvent utilizat la testarea adulților pentru consumul de canabis (ingestie). Instrumentul de confirmare pentru acest test caută Carboxy THC, metabolitul de droguri al THC. Prezența Carboxy THC indică ingestia, deoarece se găsește numai dacă organismul a metabolizat THC.
Testul de expunere a părului (ChildGuard®): Părul are o suprafață poroasă, astfel încât substanțele din mediul înconjurător tind să se lipească de el, făcând posibilă testarea expunerii. Acest test este cel mai adesea utilizat pentru minori sau pentru cei aflați sub tutelă legală, atunci când se consideră că mediul lor nu este sigur din cauza expunerii la substanțe. Acesta este un test pentru ingestie și expunere și, prin urmare, testul de confirmare caută atât Carboxy THC, cât și THC. Acesta este un test special, deoarece, spre deosebire de testul obișnuit de depistare a drogurilor în păr, testul de expunere va raporta un rezultat pozitiv confirmat dacă THC sau Carboxy THC, sau ambele sunt prezente în probă. Acesta este singurul test de depistare a drogurilor pe păr care poate testa expunerea pasivă la droguri fără a fi nevoie de ingerare. Este benefic pentru donatorii care sunt expuși la medii nocive, dar care pot sau nu să ingereze ei înșiși substanțele, deși poate avea loc o ingestie accidentală. Donatorii care au tendința de a-și pune frecvent mâinile în gură (cei mai tineri, cei cu dizabilități de dezvoltare etc.) pot ingera accidental reziduuri de substanțe din mediul lor.
Figura 3 ilustrează un test de screening pe o probă de păr pentru ingestia de canabinoizi. Se poate observa că există numeroase canabinoide care sunt detectate în proba care ar putea duce la un test care necesită o privire mai atentă cu teste de confirmare. Nivelul cumulativ al compușilor canabinoizi detectați (THC, Carboxy, alții) ar contribui cu toții la atingerea nivelului limită pentru screening (1 pg/mg). În cazul în care cantitatea detectabilă de compuși dintr-o probă se situează sub nivelul limită de screening, proba va fi examinată și verificată de un cercetător cu certificare negativă și va fi raportată ca rezultat negativ.
Figura 4 ilustrează testul de confirmare pentru ingestie care ar urma testului de depistare din exemplul de specimen din figura 3, dacă cantitatea detectabilă de compuși din clasa de droguri canabinoide a depășit nivelul limită de depistare de 1 pg/mg. Deoarece acesta este un test de confirmare a ingestiei, acesta va detecta doar nivelurile specifice de Carboxy THC. În cazul în care nivelurile depășesc nivelul limită de confirmare a Carboxy THC (0,05 pg/mg), rezultatele vor fi examinate și verificate de către un cercetător cu certificare pozitivă și apoi vor fi raportate ca rezultate pozitive confirmate. În cazul în care nivelurile de Carboxy THC nu depășesc nivelurile limită de confirmare, rezultatele vor fi examinate și verificate de un cercetător de certificare negativ și vor fi raportate ca rezultate negative.
Figura 5 este similară cu figura 3, dar ilustrează depistarea unui specimen care ar indica o expunere în mediul înconjurător, nu o ingestie. Chiar dacă lipsește Carboxy THC, THC și alți canabinoizi ar contribui la nivelurile cumulative din probă.
Figura 6 ilustrează testul de confirmare care ar urma testului de depistare a expunerii la THC pentru exemplul de probă din figura 5. Din nou, veți observa lipsa de Carboxy THC în probă, acest lucru se datorează faptului că THC nu a fost metabolizat de către donator, ceea ce implică, în general, o expunere în mediu. Testul de confirmare a expunerii la mediul înconjurător ar detecta, de asemenea, Carboxy THC dacă acesta este prezent.
Tehnicile de screening și de confirmare, precum și nivelurile limită pot varia de la un specimen la altul. Sperăm că o mai bună înțelegere a semnificației acestor elemente și a funcțiilor lor în cadrul domeniului de testare a drogurilor poate contribui la lărgirea cunoștințelor generale cu privire la modul în care pot fi utilizate diferite teste de specimen și paneluri de droguri pentru a obține cele mai bune rezultate.
Michelle Lach, redactor-șef al revistei Substance/NeoTox și director de marketing la USDTL, lucrează în industria de testare a drogurilor de peste 5 ani pentru a contribui la o mai bună înțelegere a serviciilor avansate de testare a drogurilor pentru public, astfel încât să poată fi utilizate testele potrivite și cele mai bune rezultate.
.