Se estimează că 90% din toate substanțele cancerigene sunt și mutagene. Testul Ames, dezvoltat inițial de Dr. Bruce Ames și colegii săi, utilizează bacterii modificate sensibile la agenți mutageni pentru a evalua capacitatea unui compus de a provoca mutații directe ale ADN-ului. Evenimentele de mutație inversă determină bacteriile să revină la o stare protrofică și să se dezvolte pe medii deficitare în nutrienți selectați. Acest test se numește testul de mutagenitate Salmonella Ames Salmonella/microsom (testul Salmonella; testul Ames), a fost utilizat pentru a confirma mecanismele mutagene pentru mai mulți agenți cancerigeni cunoscuți și a fost folosit pentru a descoperi noi agenți cancerigeni necunoscuți anterior în produsele de consum. Administrația pentru Alimente și Medicamente (FDA) utilizează în prezent testul Ames pentru a depista rapid și ieftin numeroase substanțe chimice. Acele câteva substanțe chimice care par a fi mutagene prin testul Ames sunt testate mai departe pe animale pentru a evalua puterea lor cancerigenă.
Pentru utilizarea în testul Ames au fost dezvoltate mai multe tulpini de testare diferite, compuse atât din Salmonella typhimurium, cât și din Escherichia coli, care detectează tipuri specifice de mutații, cum ar fi perechile de baze sau deplasările de cadre, și sunt mai sensibile la agenți specifici. Îmbunătățirile aduse testului au sporit sensibilitatea tulpinilor la intrarea compușilor, au introdus mecanisme deficitare de reparare a ADN-ului și au conferit capacități de bioactivare metabolică. De asemenea, metoda originală a plăcii de turnare a fost în mare parte înlocuită cu o metodă mai recentă de testare a fluctuației, care utilizează o etapă de expunere la lichid, incubare și reversie și care folosește un indicator colorimetric de pH pentru a demonstra creșterea bacteriană. Aceste îmbunătățiri au fost combinate pentru a reduce limitele de detecție, pentru a crește amploarea compușilor care pot fi detectați, pentru a permite adaptări de mare randament și pentru a face testul mai relevant din punct de vedere biologic pentru oameni. EBPI oferă multe opțiuni de testare diferite pentru fiecare dintre cele trei metode de kit descrise mai jos, pentru a asigura succesul analizei dumneavoastră mutaționale.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Conține 1 bacterie, reactivi, controale și materiale plastice)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Conține 2 reactivi bacterieni, controale și materiale plastice)
5051S9 Enzime de activare (concepute pentru testul Ames)
O versiune în microplăci a testului Ames tradițional „pe placă turnată”. Kitul Muta-ChromoPlateTM este sensibil și ușor de utilizat. Este utilizat în mod obișnuit pentru a detecta potențialul mutagen al substanțelor chimice individuale sau al amestecurilor de substanțe chimice din apă, ape reziduale, sedimente, extracte apoase din aer, substanțe chimice noi, alimente, produse cosmetice, produse farmaceutice și orice alt material care poate fi pus în soluție apoasă sau în micro-suspensie, astfel încât să poată fi absorbit de tulpina de testare.
6041 Ames-384 ISO Basic Kit (Conține 1 bacterie, reactivi, controale și materiale plastice)
6041-2BS Ames-384 ISO Bacterial Strain Kit (Conține 2 reactivi bacterieni, controale și materiale plastice)
Kit-ul Ames ISO Basic Kit este o variantă de testare a fluctuației a binecunoscutului „Ames Test” care utilizează un format de expunere a probelor de 48 de godeuri pe o microplăcuță de 384 de godeuri pentru a reduce cantitatea de reactivi și materiale plastice utilizate. Procedura Ames ISO a fost dezvoltată pentru a testa materialele mutagene într-o varietate de surse, cum ar fi probele de aer și apă din mediul înconjurător, alimente, produse de îngrijire personală și efluenți industriali, prin testul de fluctuație, care este o variantă a tradiționalului „Test Ames”.
Metoda Ames ISO oferă cercetătorilor o metodă de testare fiabilă, ușor de configurat și de executat, care se pretează la probe în soluție apoasă sau în suspensie și care produce un punct final colorimetric ușor de detectat după 2-3 zile de incubare la 37 °C.
5041 Ames Modified ISO Basic Kit (Conține 1 bacterie, reactivi, controale și materiale plastice)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (Conține 2 reactivi bacterieni, controale și materiale plastice)
Această metodă de testare Ames este o modificare a testului de fluctuație Ames ISO. Tulpinile bacteriene sunt preexpuse la diferite concentrații de compuși mutageni cu un mediu de creștere în suspensie timp de 100 de minute. Fiecare diluție se efectuează în triplu exemplar.
Eșantioanele sunt apoi transferate, amestecate cu o soluție de reversie și placate pe o placă cu 96 de godeuri, în timp ce se utilizează un format de evaluare cu 48 de godeuri. Probele sunt incubate timp de 2-3 zile, iar numărul de colonii de reversie (godeuri individuale) este numărat prin analiză colorimetrică.
Ce test Ames este cel mai bun pentru cercetarea mea
Testul Ames Muta-ChromoPlate
- Ideal pentru evaluarea directă a probelor de mediu
- Utilizări educaționale pentru proiecte în clasă (ușor de preformat)
- Formatul de 96 de godeuri pe plăci de 96 de godeuri. Mai multe puncte finale/probă pot îmbunătăți semnificația
- Expunerea bacteriană are loc pe tot parcursul testului
- Extrem de ușor de utilizat, cu etape minime necesare pentru obținerea rezultatelor
- Excelent pentru testarea materialelor volatile
- Nu sunt necesare etape de preconcentrare, se utilizează volume mari de probe
- Rezultate mai sensibile în comparație cu testele de încorporare pe placă
Teste ISO și ISO Ames modificate
- Ideal pentru descoperiri farmaceutice și molecule noi
- Formatul de 48 de godeuri în plăci de 96 sau 384 de godeuri reduce numărul de plăci necesare pentru dezvoltarea rezultatelor
- METODĂ CU TURAȚIE MARE! Multe probe sau niveluri de diluție pot fi testate rapid
- Sunt necesare probe de dimensiuni mai mici
- Concentrația bacteriană este verificată prin densitate optică (asigură faza de creștere logaritmică)
- Reducerea numărului de materiale plastice și reactivi necesari, mai puțină eliminare
- Cantificarea este simplă, iar notarea testului este rapidă și ușoară
- Sesizarea este mai sensibilă decât testul de încorporare în plăci
- Utilizează preperioada de expunere pentru a spori absorbția bacteriană
- Concentrație de expunere mai consistentă în timpul fazelor de creștere auxotrofă
Kituri de testare Ames
EBPI oferă o mare varietate de metode de testare Ames pentru cercetare și dezvoltare, prelevarea de probe de mediu și proiectele de descoperire a medicamentelor.
|
Muta…ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Modified Ames ISO Test |
.