Níveis de corte explicados.
Por Michelle Lach, MSIMC
Testes preliminares (isto é, testes iniciais, triagem), confirmação e níveis de corte são algumas das complexidades dos testes de drogas que muitas vezes podem ser mal compreendidas por aqueles fora do ambiente laboratorial. Para lançar mais luz sobre o tema, quisemos quebrar os passos dos nossos testes e explicar como eles correspondem aos resultados que enviamos aos nossos clientes.
Para começar, é importante entender a diferença entre as classes de drogas, e drogas, incluindo metabólitos de drogas. As classes de drogas são os grupos abrangentes sob os quais são categorizadas as drogas individuais de natureza similar e, portanto, são a base de como os nossos painéis de teste de drogas são classificados (ou seja, anfetaminas, canabinóides, opiáceos, etc.) (Figura 1).
Em uma classe de drogas, há drogas e seus metabólitos (formados quando uma droga é metabolizada pelo corpo). Fazemos testes para drogas específicas e/ou metabólitos de drogas que são mais úteis para implicar a ingestão ou exposição de substâncias de abuso. Por exemplo, existem muitas substâncias diferentes que se enquadram na classe de drogas anfetamínicas, mas só testamos para anfetaminas, MDA, MDEA, MDMA e metanfetaminas (Figura 2). O mesmo se aplica aos canabinóides, com mais de 100 compostos individuais que podem ser categorizados sob essa classe de drogas. O principal ingrediente farmacologicamente ativo da planta de cannabis é o tetrahidrocanabinol (THC), portanto nossos testes procuram apenas o THC, ou o metabolito da droga Carboxi THC.
Testes e Resultados Iniciais
Screening é o processo de envio de todos os espécimes através de instrumentação altamente sensível que é rápido e eficaz para determinar se um espécime pode conter substâncias de interesse. O processo de triagem testa cumulativamente para muitos compostos que se enquadram nas classes de medicamentos em questão. As classes de drogas rastreadas são determinadas pelos painéis de drogas selecionados pelo cliente para testes.
Se uma amostra passar pelo processo de rastreamento e nada for detectado, nossos cientistas certificadores negativos verificam os resultados negativos e o relatório negativo é enviado. É por isso que os resultados negativos geralmente têm um tempo de retorno rápido.
Se uma amostra passa pelo processo de triagem e algo é detectado, significa que precisamos dar uma olhada mais de perto para ver o que é, mas isso não significa que tenha dado positivo para qualquer droga ou metabólito de droga específica ainda. Significa apenas que a amostra não deu negativo quando foi testada para muitos compostos diferentes. Neste ponto, a amostra deve ir para o teste de confirmação.
Testes de Confirmação e Resultados
Como um laboratório de toxicologia forense credenciado, somos obrigados a confirmar todos os resultados que relatamos como positivos. Para realizar os testes de confirmação, outra parte do espécime original é analisada por um instrumento mais avançado e específico, mas desta vez, devido aos resultados da triagem, temos uma idéia do que precisamos procurar e quais drogas considerar. O teste de confirmação leva mais tempo para ser concluído do que a triagem, pois o instrumento está procurando drogas individuais e metabólitos de drogas. A confirmação de resultados positivos pode demorar até 24-48 horas adicionais após a conclusão dos resultados do rastreio.
Níveis de corte
Níveis de corte são os limiares de detecção de compostos que são definidos no instrumento de teste.
Para usar o exemplo do canabinóide, nosso nível de corte de triagem para a classe de medicamento canabinóide em uma amostra de cabelo é de 1 pg/mg. Se qualquer uma das centenas de canabinóides registrar cumulativamente acima deste nível de corte, a amostra iria para o teste de confirmação. Como mencionado anteriormente, nossa instrumentação de confirmação está procurando apenas um de dois metabólitos específicos de drogas/droga que são de interesse quando se trata de teste de drogas para ingestão ou exposição a cannabis, Carboxi THC (ingestão) e/ou THC (exposição). Quaisquer outros canabinóides que possam ter contribuído para alcançar os níveis de corte de triagem não são testados durante a confirmação, pois atualmente não são considerados relevantes para detectar a ingestão ou exposição de cannabis.
Níveis de corte de triagem e confirmação geralmente causam confusão quando se trata de resultados de testes. Frequentemente nos perguntam como um teste regular de drogas para o cabelo pode confirmar positivo para Carboxi THC a, digamos 0.15 pg/mg, quando o corte de triagem está bem acima desse limite a 1 pg/mg. A resposta é que os testes de rastreio e de confirmação são testes completamente diferentes, usando instrumentos diferentes, olhando para coisas diferentes. Os níveis de corte de triagem foram alcançados com múltiplos canabinóides sendo testados e registrados acima do nível de corte do teste de triagem (1 pg/mg). Quando a amostra passou para testes de confirmação separados (um teste totalmente diferente do início ao fim), apenas Carboxi THC estava sendo medido, com diferentes níveis de corte (0,05 pg/mg). Isto significa que, de todos os canabinóides registrados na amostra, havia apenas 0,15 pg/mg de Carboxi THC na amostra.
Ao usar o exemplo de cannabis específico para testes capilares, é importante notar que temos dois testes distintos para a detecção de THC em uma amostra capilar. Embora o processo de triagem para ambos os testes seja o mesmo, os processos de preparação e confirmação dos testes são diferentes. As figuras 3-6 ilustram a diferença de detecção de THC entre os dois testes.
Teste de drogas para o cabelo: Este teste de drogas é mais frequentemente usado quando se testa adultos para o uso de cannabis (ingestão). O instrumento de confirmação deste teste é a procura de Carboxi THC, o metabolito da droga THC. A presença de Carboxi THC indica ingestão, pois só é encontrado se o organismo tiver metabolizado THC.
Teste de Exposição do Cabelo (ChildGuard®): O cabelo tem uma superfície porosa, por isso as substâncias do ambiente tendem a aderir a ele, tornando possível o teste de exposição. Este teste é mais frequentemente usado para menores de idade, ou sob tutela legal, quando se pensa que os seus ambientes não são seguros devido à exposição a substâncias. Este é um teste de ingestão e exposição e, portanto, o teste de confirmação procura tanto o Carboxi THC como o THC. Este é um teste especial porque, ao contrário do teste normal de drogas para o cabelo, o teste de exposição irá relatar um positivo confirmado se THC ou Carboxy THC, ou ambos estão presentes no espécime. Este é o único teste de drogas capilares que pode testar a exposição passiva a drogas sem a necessidade de ingestão. É benéfico para doadores que estão sendo expostos a ambientes prejudiciais, mas podem ou não estar ingerindo as substâncias em si, embora a ingestão acidental possa ocorrer. Doadores que tendem a colocar as mãos na boca frequentemente (mais jovens, deficientes de desenvolvimento, etc.) podem acidentalmente ingerir resíduos de substâncias do seu ambiente.
Figure 3 ilustra um teste de triagem em uma amostra de cabelo para ingestão de canabinóides. Você pode ver que há inúmeros canabinóides que são detectados na amostra que poderiam resultar em um teste que precisaria de uma análise mais detalhada com o teste de confirmação. O nível cumulativo de compostos canabinoides detectados (THC, Carboxi, outros) contribuiria para alcançar o nível de corte para a triagem (1 pg/mg). Se a quantidade detectável de compostos em uma amostra cair abaixo do nível de corte para triagem, a amostra será revisada e verificada por um Cientista Certificador Negativo e reportada como um resultado negativo.
Figure 4 ilustra o teste de confirmação para ingestão que seguiria o teste de triagem do exemplo da amostra na Figura 3 se a quantidade detectável de compostos na classe do medicamento canabinoide excedesse o nível de corte de triagem de 1 pg/mg. Como este é um teste de confirmação para ingestão, ele estará detectando apenas os níveis específicos de Carboxi THC. Se os níveis excederem o nível de corte de confirmação de Carboxy THC (0,05 pg/mg), os resultados serão revistos e verificados por um Cientista Certificador Positivo e depois relatados como um resultado positivo confirmado. Se os níveis de Carboxy THC não excederem os níveis de corte de confirmação, os resultados serão revistos e verificados por um Cientista Certificador Negativo e reportados como um resultado negativo.
Figure 5 é semelhante à Figura 3, mas ilustra a triagem de uma amostra que indicaria exposição ambiental, não a ingestão. Mesmo havendo falta de Carboxi THC, o THC e outros canabinóides contribuiriam para os níveis cumulativos na amostra.
Figure 6 ilustra o teste de confirmação que seguiria o teste de triagem para exposição ao THC para o exemplo da amostra na Figura 5. Novamente, você notará a falta de Carboxi THC na amostra, isto é porque o THC não foi metabolizado pelo doador, geralmente implicando exposição ambiental. O teste de confirmação de exposição ambiental também detectaria Carboxy THC se ele estivesse presente.
Técnicas de rastreamento e confirmação, assim como os níveis de corte podem variar de um espécime para outro. Esperamos que ter um melhor entendimento do significado desses elementos e suas funções dentro do reino dos testes de drogas possa ajudar a ampliar o conhecimento geral de como diferentes testes de espécimes e painéis de drogas podem ser utilizados para obter os melhores resultados.
Michelle Lach, Editor Chefe de Substâncias/NeoTox e Gerente de Marketing da USDTL, vem trabalhando na indústria de testes de drogas há mais de 5 anos para ajudar a trazer uma melhor compreensão dos serviços avançados de testes de drogas para o público, para que os testes certos e os melhores resultados possam ser utilizados.