A estimado 90% de todos os carcinógenos também são mutagênicos. O Teste Ames, originalmente desenvolvido pelo Dr. Bruce Ames e seus colegas, usa bactérias modificadas sensíveis a agentes mutagênicos para avaliar a capacidade dos compostos de causar mutações diretas no DNA. Eventos mutacionais inversos fazem com que as bactérias voltem ao estado protrófico e cresçam em meios deficientes em nutrientes selecionados. Este teste é chamado de ensaio de mutagenicidade Salmonella Ames Salmonella/microssoma (teste de Salmonella; teste de Ames), tem sido usado para confirmar mecanismos mutagênicos para vários carcinógenos conhecidos, e usado para descobrir carcinógenos novos, anteriormente desconhecidos, em produtos de consumo. A Food and Drug Administration (FDA) agora usa o teste Ames para rastrear muitos produtos químicos de forma rápida e barata. Aqueles poucos produtos químicos que parecem ser mutagênicos pelo teste Ames são testados em animais para avaliar sua potência carcinogênica.
Muitas cepas diferentes de testadores compostos de Salmonella typhimurium e Escherichia coli foram desenvolvidas para uso no ensaio Ames que detectam tipos específicos de mutação como par de base ou framehift e são mais sensíveis para agentes específicos. As melhorias no teste aumentaram a susceptibilidade da estirpe à entrada de compostos, introduziram mecanismos deficientes de reparação do ADN e conferiram capacidades de bioactivação metabólica. O método original de pour plate também foi amplamente substituído por um método de ensaio de flutuação mais recente que emprega uma exposição líquida, incubação e etapa de reversão e usa um indicador colorimétrico de pH para demonstrar o crescimento bacteriano. Estas melhorias foram combinadas para baixar os limites de detecção, aumentar a amplitude dos compostos que podem ser detectados, permitir adaptações de alto rendimento e tornar o ensaio mais relevante biologicamente para os seres humanos. O EBPI oferece muitas opções diferentes de ensaios para cada um dos três métodos de kit descritos abaixo para garantir o sucesso de sua análise mutacional.
Kit Básico Muta-ChromoPlate™
5051 Kit Básico Muta-ChromoPlate (Contém 1 bactéria, reagentes, controlos e plásticos)
B5051 Kit de Esfregaço Bacteriano Muta-ChromoPlate (Contém 2 reagentes bacterianos, controles e plásticos)
5051S9 Enzimas de ativação (projetadas para o Teste Ames)
Uma versão em microplaca do tradicional Teste Ames “pour plate”. O Kit Muta-ChromoPlateTM é sensível e de fácil utilização. É comumente usado para detectar o potencial mutagênico de produtos químicos individuais ou misturas de produtos químicos em água, águas residuais, sedimentos, extratos aquosos de ar, novos produtos químicos, alimentos, cosméticos, produtos farmacêuticos e qualquer outro material que possa ser colocado em solução aquosa ou micro-suspensão, de modo que possa ser absorvido pela estirpe de teste.
6041 Kit Básico Ames-384 ISO (Contém 1 bactéria, reagentes, controlos e plásticos)
6041-2BS Ames-384 ISO Bacterial Strain Kit (Contém 2 reagentes bacterianos, O Ames ISO Basic Kit é uma versão de ensaio de flutuação do conhecido “Teste Ames” que usa um formato de exposição de 48 poços em uma microplaca de 384 poços para reduzir o reagente e o plástico usado. O procedimento Ames ISO foi desenvolvido para testar materiais mutagênicos em uma variedade de fontes como amostras ambientais de ar e água, alimentos, produtos de higiene pessoal e efluentes industriais pelo ensaio de flutuação que é uma variação do tradicional “Teste Ames”.
O método Ames ISO fornece aos pesquisadores um método de teste confiável que é fácil de configurar e executar, passível de amostras em solução aquosa ou em suspensão e produz um ponto final colorimétrico facilmente detectável após 2-3 dias de incubação a 37 °C.
5041 Kit Básico ISO Modificado Ames (Contém 1 bactéria, reagentes, controlos e plásticos)
5041-2BS Kit de Tensão Bacteriana ISO Modificado Ames (Contém 2 reagentes bacterianos, controlos e plásticos)
Este método de teste Ames é uma modificação do ensaio de flutuação ISO Ames. As cepas bacterianas são pré-expostas a diferentes concentrações de compostos mutagénicos com um meio de crescimento em suspensão durante 100 minutos. Cada diluição é executada em triplicado.
As amostras são então transferidas, misturadas com uma solução de reversão e plaqueadas em uma placa de 96 poços, usando um formato de avaliação de 48 poços. As amostras são incubadas durante 2-3 dias e o número de colónias revertentes (poços individuais) são contadas por análise colorimétrica.
Qual o melhor teste de Ames para a minha pesquisa
Teste de Ames Muta-ChromoPlate
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- Teste para avaliação directa de amostras ambientais
- Usos educacionais para projectos em sala de aula (fácil de pré-formar)
- 96 formato de poço em placas de 96 poços. Mais pontos finais/amostra podem melhorar a significância
- Exposição bacteriana ocorre durante todo o ensaio
- Extremamente amigável com passos mínimos necessários para obter resultados
- Excelente para testar materiais voláteis
- Não são necessários passos de pré-concentração, grandes volumes de amostra utilizados
- Resultados mais sensíveis em comparação com ensaios de incorporação de placas
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Testes ISO e ISO Ames Modificados
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- Déal para descobertas farmacêuticas e de novas moléculas
- 48- formato de poços em placas de 96 ou 384 poços reduz as placas necessárias para o desenvolvimento de resultados
- MÉTODO DE ALTA POLUIZAÇÃO! Muitas amostras ou níveis de diluição podem ser testados rapidamente
- Tamanho de amostras menores necessárias
- Concentração bacteriana é verificada pela densidade óptica (assegura a fase de crescimento em log)
- Reagentes e plásticos reduzidos necessários, menos descarte
- Quantificação é simples e a pontuação do teste é rápida e fácil
- O ensaio é mais sensível que o ensaio de incorporação de placa
- Utiliza pré-período de exposição para aumentar a absorção bacteriana
- Concentração de exposição mais consistente durante as fases de crescimento auxotrófico
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Kits de teste Ames
EBPI oferece uma grande variedade de métodos de teste Ames para pesquisa e desenvolvimento, amostragem ambiental, e projetos de descoberta de drogas.
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Muta-ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Modified Ames ISO Test |
