Screening en bevestiging cutoff levels uitgelegd.
door Michelle Lach, MSIMC
Preliminaire testen (d.w.z. initiële testen, screening), bevestiging, en cutoff levels zijn enkele van de complexiteiten van drugstesten die vaak verkeerd begrepen kunnen worden door mensen buiten de laboratorium setting. Om meer licht op het onderwerp te werpen, wilden we de stappen van ons testen opsplitsen en uitleggen hoe ze overeenkomen met de resultaten die we naar onze klanten sturen.
Om te beginnen is het belangrijk om het verschil te begrijpen tussen drugsklassen en drugs, met inbegrip van drugmetabolieten. Drugsklassen zijn de overkoepelende groepen waaronder individuele drugs die vergelijkbaar zijn in aard worden gecategoriseerd, en vormen dus de basis van hoe onze drugstestpanelen zijn ingedeeld (d.w.z. amfetaminen, cannabinoïden, opiaten, enz.) (figuur 1).
Binnen een drugsklasse zijn er drugs en hun metabolieten (gevormd wanneer een drug door het lichaam wordt gemetaboliseerd). Wij testen op specifieke drugs en/of drugmetabolieten die het nuttigst zijn om de inname of blootstelling van misbruikstoffen aan te tonen. Er zijn bijvoorbeeld veel verschillende stoffen die onder de drugsklasse amfetamine vallen, maar wij testen alleen op amfetamine, MDA, MDEA, MDMA en methamfetamine (figuur 2). Hetzelfde geldt voor cannabinoïden, met meer dan 100 afzonderlijke verbindingen die in die drugsklasse kunnen worden ingedeeld. Het belangrijkste farmacologisch actieve ingrediënt van de cannabisplant is tetrahydrocannabinol (THC), dus onze tests zoeken alleen naar THC, of de drugmetaboliet Carboxy THC.
Initiële tests en resultaten
Screening is het proces waarbij alle specimens door zeer gevoelige instrumenten worden gestuurd die snel en effectief kunnen bepalen of een specimen mogelijk interessante stoffen bevat. Het screeningproces test cumulatief op vele verbindingen die binnen de gegeven drugsklassen vallen. De drugsklassen die worden gescreend worden bepaald door de drugspanels die door de klant zijn geselecteerd voor het testen.
Als een specimen door het screeningproces loopt en er niets wordt gedetecteerd, verifiëren onze Negative Certifying Scientists de negatieve resultaten en wordt het negatieve rapport verzonden. Dit is de reden waarom de negatieve resultaten over het algemeen een snelle doorlooptijd hebben.
Als een specimen door het screeningproces loopt en er iets wordt gedetecteerd, betekent dit dat we nader moeten bekijken wat het is, maar het betekent niet dat het al positief is getest op een specifieke drug of drugmetaboliet. Het betekent alleen dat het monster niet negatief testte toen het op veel verschillende verbindingen werd getest. Op dit punt moet het specimen een bevestigingstest ondergaan.
Bevestigingstests en resultaten
Als geaccrediteerd forensisch toxicologisch laboratorium zijn wij verplicht alle resultaten te bevestigen die wij als positief rapporteren. Om bevestigingstests uit te voeren, wordt een ander deel van het oorspronkelijke specimen geanalyseerd met een meer geavanceerd en specifiek instrument, maar deze keer hebben we dankzij de screeningsresultaten een idee van waar we naar moeten zoeken en met welke drugs we rekening moeten houden. Bevestigingstests nemen meer tijd in beslag dan screeningtests, omdat het instrument op zoek is naar afzonderlijke drugs en metabolieten van drugs. Het bevestigen van positieve resultaten kan nog eens 24-48 uur duren nadat de screeningresultaten zijn afgerond.
Cutoff-niveaus
Cutoff-niveaus zijn de detectiedrempels voor verbindingen die op het testinstrumentarium zijn ingesteld.
Om het voorbeeld van de cannabinoïde te gebruiken: ons cutoff-niveau voor screening van de cannabinoïde-drugsklasse in een haarmonster is 1 pg/mg. Als een van de honderden cannabinoïden cumulatief boven dit drempelniveau uitkomt, wordt het specimen ter bevestiging getest. Zoals eerder vermeld, zoekt ons bevestigingsinstrumentarium alleen naar een van de twee specifieke drugs/metabolieten die van belang zijn bij het testen op cannabisinname of -blootstelling, namelijk Carboxy THC (inname) en/of THC (blootstelling). Andere cannabinoïden die mogelijk hebben bijgedragen aan het bereiken van de cutoff-niveaus voor screening worden niet getest tijdens de bevestiging, omdat ze momenteel niet relevant worden geacht voor het opsporen van cannabisinname of -blootstelling.
Screening en bevestiging cutoff-niveaus veroorzaken vaak verwarring als het gaat om testresultaten. Ons wordt vaak gevraagd hoe een gewone haartest een positieve bevestiging kan geven voor Carboxy THC bij, laten we zeggen 0,15 pg/mg, terwijl de screenings cutoff ruim boven die grens van 1 pg/mg ligt. Het antwoord is dat de screeningtest en de bevestigingstest totaal verschillende tests zijn, waarbij verschillende instrumenten worden gebruikt en naar verschillende dingen wordt gekeken. De grenswaarden voor screening werden bereikt toen meerdere cannabinoïden werden getest die boven de grenswaarde van de screeningtest (1 pg/mg) lagen. Toen het specimen werd onderworpen aan afzonderlijke bevestigingstests (een geheel andere test van begin tot eind) werd alleen carboxy THC gemeten, met verschillende cutoff-niveaus (0,05 pg/mg). Dit betekent dat, van alle cannabinoïden die in het specimen werden geregistreerd, er slechts 0,15 pg/mg Carboxy THC in het specimen aanwezig was.
Wanneer we het cannabisvoorbeeld gebruiken dat specifiek betrekking heeft op haartesten, is het belangrijk op te merken dat we twee verschillende testen hebben voor het detecteren van THC in een haarmonster. Hoewel het screeningsproces voor beide tests hetzelfde is, verschillen de testvoorbereiding en het bevestigingsproces. De figuren 3-6 illustreren het verschil in detectie van THC tussen de twee tests.
Haarddrugstest: Deze drugstest wordt het vaakst gebruikt bij het testen van volwassenen op cannabisgebruik (inname). Het bevestigingsinstrument voor deze test is op zoek naar Carboxy THC, de drugmetaboliet van THC. Aanwezigheid van Carboxy THC wijst op ingestie, omdat het alleen wordt gevonden als het lichaam THC heeft gemetaboliseerd.
Haarblootstellingstest (ChildGuard®): Haar heeft een poreus oppervlak, zodat stoffen uit de omgeving eraan blijven kleven, waardoor een blootstellingstest mogelijk wordt. Deze test wordt meestal gebruikt bij minderjarigen of personen die onder wettelijke voogdij staan, wanneer men denkt dat hun omgeving onveilig is door blootstelling aan stoffen. Het gaat hier om een test op inname en blootstelling, en daarom wordt bij de bevestigingstest zowel naar carboxy THC als naar THC gezocht. Dit is een speciale test omdat, in tegenstelling tot de gewone haar drugstest, de blootstellingstest een bevestigde positieve zal rapporteren als THC of Carboxy THC, of beide aanwezig zijn in het specimen. Dit is de enige haar drugstest die kan testen op passieve drugblootstelling zonder de noodzaak van inname. Dit is gunstig voor donors die worden blootgesteld aan schadelijke omgevingen, maar die de stoffen al dan niet zelf binnenkrijgen, hoewel accidentele inname wel kan voorkomen. Donors die de neiging hebben hun handen vaak in de mond te stoppen (jongeren, mensen met een ontwikkelingsstoornis, enz.) kunnen per ongeluk stoffenresten uit hun omgeving binnenkrijgen.
Figuur 3 illustreert een screeningtest op een haarmonster voor de opname van cannabinoïden. U kunt zien dat er talrijke cannabinoïden in het specimen worden gedetecteerd die ertoe kunnen leiden dat een test nader moet worden bekeken met bevestigingstests. Het cumulatieve niveau van de gedetecteerde cannabinoïdeverbindingen (THC, Carboxy, andere) zou allemaal bijdragen tot het bereiken van de grenswaarde voor screening (1 pg/mg). Als de detecteerbare hoeveelheid verbindingen in een specimen onder de cutoff-norm voor screening valt, zal het specimen worden beoordeeld en geverifieerd door een negatieve certificerende wetenschapper en als negatief resultaat worden gerapporteerd.
Figuur 4 illustreert de bevestigingstest voor ingestie die zou volgen op de screeningstest van het specimenvoorbeeld in figuur 3 als de detecteerbare hoeveelheid verbindingen in de cannabinoïde-drugklasse de screening cutoff-waarde van 1 pg/mg overschrijdt. Aangezien dit een bevestigingstest voor ingestie is, worden alleen de specifieke niveaus van carboxy THC gedetecteerd. Als de niveaus de grenswaarde voor bevestiging van carboxy THC (0,05 pg/mg) overschrijden, zullen de resultaten worden bekeken en geverifieerd door een positief verklarende wetenschapper en vervolgens worden gerapporteerd als een bevestigd positief resultaat. Als de niveaus van Carboxy THC de bevestigings cutoff niveaus niet overschrijden, zullen de resultaten worden herzien en geverifieerd door een negatief certificerende wetenschapper en als negatieve resultaten worden gerapporteerd.
Figuur 5 is vergelijkbaar met Figuur 3, maar illustreert de screening van een specimen dat zou wijzen op blootstelling via de omgeving, niet ingestie. Hoewel er een gebrek aan Carboxy THC is, zouden de THC en andere cannabinoïden bijdragen aan de cumulatieve niveaus in het specimen.
Figuur 6 illustreert de bevestigingstest die zou volgen op de screeningstest voor blootstelling aan THC voor het specimen voorbeeld in figuur 5. Ook hier ziet u het ontbreken van Carboxy THC in het monster, dit komt omdat THC niet door de donor is gemetaboliseerd, wat over het algemeen blootstelling door de omgeving impliceert. De bevestigingstest voor milieublootstelling zou ook Carboxy THC detecteren als het aanwezig is.
Screening- en bevestigingstechnieken, evenals de cutoff niveaus, kunnen per specimen verschillen. We hopen dat een beter begrip van de betekenis van deze elementen en hun functies binnen de drug testen rijk kan helpen verbreden van de algemene kennis van hoe verschillende specimen tests en drug panels kunnen worden gebruikt om de beste resultaten te krijgen.
Michelle Lach, hoofdredacteur van Substance/NeoTox en marketing manager bij USDTL, werkt al meer dan 5 jaar in de drug test industrie om te helpen een beter begrip van geavanceerde drug test diensten aan het publiek te brengen, zodat de juiste tests en de beste resultaten kunnen worden gebruikt.