Geschat wordt dat 90% van alle carcinogenen ook mutagenen zijn. Bij de Ames-test, die oorspronkelijk door Dr. Bruce Ames en zijn collega’s is ontwikkeld, wordt met behulp van gemodificeerde bacteriën die gevoelig zijn voor mutagene stoffen, nagegaan in hoeverre een stof directe DNA-mutaties kan veroorzaken. Omgekeerde mutaties veroorzaken dat de bacterie terugkeert naar een protrofe toestand en groeit op een medium dat een tekort aan bepaalde voedingsstoffen heeft. Deze test, die de Salmonella Ames-microsoommutageniciteitstest (Salmonella-test; Ames-test) wordt genoemd, is gebruikt om mutagene mechanismen voor verscheidene bekende carcinogenen te bevestigen en is gebruikt om nieuwe, voorheen onbekende carcinogenen in consumentenproducten te ontdekken. De Food and Drug Administration (FDA) gebruikt de Ames-test nu om een groot aantal chemische stoffen snel en goedkoop te screenen. De weinige chemische stoffen die met de Ames-test mutageen blijken te zijn, worden verder op dieren getest om hun carcinogene werking te bepalen.
Voor de Ames-test zijn veel verschillende teststammen van zowel Salmonella typhimurium als Escherichia coli ontwikkeld, die specifieke mutatietypes als base-pair of frameshift detecteren en gevoeliger zijn voor specifieke agentia. Verbeteringen in de test hebben de gevoeligheid van stammen voor verbindingen verhoogd, deficiënte DNA-herstelmechanismen geïntroduceerd en metabole bioactiveringscapaciteiten verleend. De oorspronkelijke gietplaatmethode is ook grotendeels vervangen door een recentere fluctuatietestmethode waarbij gebruik wordt gemaakt van een vloeistofblootstelling, incubatie- en omkeerstap en een colorimetrische pH-indicator om de bacteriegroei aan te tonen. De combinatie van deze verbeteringen heeft geleid tot lagere detectielimieten, een groter aantal verbindingen dat kan worden opgespoord, aanpassingen met een hoge verwerkingscapaciteit en een biologische relevantie van de test voor de mens. EBPI biedt veel verschillende assays aan voor elk van de drie hieronder beschreven kitmethodes om het succes van uw mutatieanalyse te verzekeren.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Bevat 1 bacterie, reagentia, controles en kunststoffen)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Bevat 2 bacteriële reagentia, controles en plastics)
5051S9 Activeringsenzymen (ontworpen voor de Ames-test)
Een microtiterplaatversie van de traditionele “gietplaat” Ames-test. De Muta-ChromoPlateTM -kit is gevoelig en gebruikersvriendelijk. Hij wordt algemeen gebruikt voor de detectie van het mutageen potentieel van afzonderlijke chemische stoffen of mengsels van chemische stoffen in water, afvalwater, sediment, waterige luchtextracten, nieuwe chemische stoffen, voedingsmiddelen, cosmetica, geneesmiddelen en elk ander materiaal dat in een waterige oplossing of microsuspensie kan worden gebracht, zodat het door de teststam kan worden opgenomen.
6041 Ames-384 ISO Basic Kit (Bevat 1 bacteriële stam, reagentia, controles en kunststoffen)
6041-2BS Ames-384 ISO Bacteriestam Kit (Bevat 2 bacteriële reagentia, controles en plastics)
De Ames ISO Basic Kit is een fluctuatie assay verison van de bekende “Ames Test” die gebruik maakt van een 48-well monster blootstelling formaat op een 384-well microtiterplaat om reagentia en plastic te verminderen gebruikt. De Ames ISO-procedure is ontwikkeld voor het testen van mutagene stoffen in een verscheidenheid van bronnen zoals lucht- en watermonsters, voedingsmiddelen, producten voor persoonlijke verzorging en industriële effluenten door middel van de fluctuatietest die een variant is van de traditionele “Ames-test”.
De Ames ISO-methode biedt onderzoekers een betrouwbare testmethode die gemakkelijk op te zetten en uit te voeren is, geschikt is voor monsters in waterige oplossing of suspensie en een gemakkelijk detecteerbaar colorimetrisch eindpunt oplevert na 2-3 dagen incubatie bij 37 °C.
5041 Ames Modified ISO Basic Kit (Bevat 1 bacteriële stam, reagentia, controles en kunststoffen)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (Bevat 2 bacteriële reagentia, controles en kunststoffen)
Deze Ames-testmethode is een modificatie van de Ames ISO fluctuatiebepaling. Bacteriestammen worden vooraf gedurende 100 minuten blootgesteld aan verschillende concentraties van de mutagene verbindingen met een groeimedium in suspensie. Elke verdunning wordt in triplo uitgevoerd.
De monsters worden vervolgens overgebracht, vermengd met een omkeeroplossing en uitgeplaat op een 96-well-plaat, waarbij een 48-well-evaluatieformaat wordt gebruikt. De monsters worden gedurende 2-3 dagen geïncubeerd en het aantal terugmutantkolonies (individuele wells) wordt geteld door colorimetrische analyse.
Welke Ames-test is het beste voor mijn onderzoek
Muta-ChromoPlate Ames Test
- Ideaal voor directe beoordeling van milieumonsters
- Educatieve toepassingen voor klaslokaalprojecten (gemakkelijk uit te voeren)
- 96 wells formaat op 96 wells platen. Meer eindpunten/monster kan significantie verbeteren
- Blootstelling aan bacteriën vindt gedurende de hele test plaats
- Uiterst gebruiksvriendelijk met minimale stappen nodig om resultaten te verkrijgen
- Uitstekend voor het testen van vluchtige stoffen
- Geen preconcentratiestappen nodig, grote monstervolumes gebruikt
- gevoeligere resultaten in vergelijking met plaatinsluitingen
ISO en Gewijzigde ISO Ames Tests
- Ideaal voor farmaceutische en nieuwe molecule ontdekkingen
- 48-well formaat in 96 of 384-well platen vermindert platen nodig voor resultaatontwikkeling
- HOOGE DROUGPUT METHOD! Veel monsters of verdunningsniveaus kunnen snel worden getest
- Kleinere monstergroottes nodig
- Bacterieconcentratie wordt gecontroleerd door optische dichtheid (zorgt voor loggroeifase)
- Er zijn minder kunststoffen en reagentia nodig, minder afvalverwijdering
- Kwantificering is eenvoudig en het scoren van de test is snel en gemakkelijk
- De test is gevoeliger dan de plaatincorporatietest
- Gebruikt preblootstellingsperiode om bacteriële opname te verbeteren
- Samenhangender blootstellingsconcentratie tijdens auxotrofe groeifasen
Ames Test Kits
EBPI biedt een grote verscheidenheid aan Ames testmethodes voor onderzoek en ontwikkeling, milieubemonstering, en geneesmiddelen ontdekkingsprojecten.
|
Muta-ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Gemodificeerde Ames ISO Test |
