抗リン脂質抗体は主にβ2-糖タンパク質Iかプロトロンビンを標的：リン脂質の役割もある？
多くの抗リン脂質抗体の結合には、脂質結合性抗凝固タンパク質であるβ2-糖タンパク質I（アポリポタンパク質H）が必要であることは、ELISA法による試験で一般に受け入れられています。 現在では、少なくともかなりの割合の患者がβ2-糖タンパク質Iのエピトープに直接結合するAPLAを持っていると思われるが、これが普遍的な現象であるかどうかはまだ議論の余地がある。 β2-糖タンパク質Iに対する自己抗体は低親和性の単反応性抗体であることが多く、リン脂質がなくても負に帯電していればこの分子に特異的である。 抗β2-糖タンパク質I抗体は、さらに、種を超えて保存されているエピトープに向けられるため、何らかの機能的意義を持っている可能性がある。 ある研究では、抗カルジオリピン抗体と抗β2-糖タンパク質I抗体のレベル、軽鎖の結合、IgGサブクラスには良い相関があり、両測定法で同じ抗体が測定されている可能性が示唆されている
抗リン脂質抗体のもう一つの共通タンパク質抗原はプロトロンビンです。 プロトロンビンに対する抗体は、β2-糖タンパク質Iに対する抗体よりも、ループスの抗凝固活性をより多く説明する可能性があります。 表1に示した他の脂質結合蛋白に対する抗体の有病率については、まだ不明な点が多い。 血栓症の既往があり、IgG抗リン脂質抗体を持つ22人の患者を対象にしたある研究では、22人全員に高レベルの抗β2-糖タンパク質Iが認められ、11人（50％）に抗プロトロンビン抗体、12人に抗プロテインS抗体、4人に抗プロテインC抗体が検出された。
ループスアンチコアグラントのようにβ2-糖タンパク質Iに結合する抗体は、一般的な抗リン脂質抗体の範囲よりも抗リン脂質症候群の病的状態と良い相関があるようである 。 少なくともある研究では、抗β2-糖蛋白Iは抗プロトロンビン抗体よりも罹患率と相関していましたが、139人の患者を含む別の研究では、抗β2-糖蛋白Iと抗プロトロンビン抗体の両方が深部静脈血栓症の発生と有意に関連していました（p = 0.そのため、β2-糖蛋白質Iは、病的な抗リン脂質抗体に対して機能的なエピトープを提供する候補として、特に有望視されているようである。 例えば、β2-糖タンパク質Iは、内在性血液凝固経路の接触活性化、プロトロンビナーゼ反応、およびリポタンパク質リパーゼによる第XII因子の活性化を阻害することが示されている。 また、β2-糖タンパク質Iは単球と内皮の相互作用に関与している可能性がある。 ある報告では、β2-糖タンパク質Iは活性化プロテインCの抗凝固活性を中和するとされているが、我々の研究室や他の研究室からの証拠は、逆にプロテインCの補酵素であるプロテインSの阻害を阻害し、この系で追加の抗凝固補酵素として働いていることを示唆している …
病的な抗リン脂質抗体は、β2-糖タンパク質Iやおそらく他の脂質結合タンパク質のエピトープに向けられるという多くの証拠があることから、リン脂質は抗リン脂質症候群と無関係なのでしょうか？ なぜなら、ユニークなリン脂質環境は、抗凝固機能や抗体結合に依存するタンパク質の構造に重要な調節を与える可能性があるからである。 Roubeyらは、β2-糖タンパク質I依存性抗リン脂質抗体は低親和性抗体であり、ELISAで最適に検出するためには、高密度のβ2-糖タンパク質Iに二価で結合する必要があることを明らかにした。 これらの抗体は、液相ではβ2-糖タンパク質Iとの結合が比較的弱く、β2-糖タンパク質Iがリン脂質ミセルに複合化されると結合が著しく改善される。 実際、リン脂質非存在下で自己抗体とβ2-糖タンパク質Iとの相互作用を検出するアッセイは、γ線照射したポリスチレンプレートの使用に依存しており、このプレートもリン脂質と同様に、負電荷を含む抗原のバックグラウンド表面を提供する。 血管内にはγ線照射したプラスチックは存在しないので、β2-糖タンパク質Iをリン脂質に複合化させた標準的な抗カルジオリピンアッセイは、β2-糖タンパク質I特異的検査よりも、これらの自己抗体について非常によく似た、より生理的な検査を提供すると主張することができる。 プロトロンビンに対する特異性を持つ抗体の検出において、リン脂質または負に帯電したポリスチレンに対する同様の依存性が報告されている。 自己免疫疾患患者の自己抗体は、この短縮型タンパク質に反応せず、カルジオリピンに接着しないことがわかった。 その後、同じグループが、β2-糖タンパク質Iの第5ドメインに、リン脂質結合部位と抗カルジオリピン抗体によって認識される領域の両方を含む領域を特定した。 最初のケースでは、リン脂質環境のコンテキストで抗体の検出が向上することは、抗体の病原性に関連する可能性がありますし、そうでない可能性もあります。
Roubeyらは、酸化ポリスチレンプレートを用いたβ2-糖タンパク質Iに対する抗体の検出率が向上したのは、β2-糖タンパク質Iの密度が高くなったためであり、その密度はマイナスに帯電した表面により効率的に詰まって、二価抗体相互作用に適したテンプレートを提供しているようである。 プロトロンビンを用いた同様の研究において、Galli らは、バックグラウンドが酸化プラスチックではなくホスファチジルセリンの場合にプロトロンビンに対する抗体の検出が増加することを見出したが、この場合、その違いは抗原密度の増加によるものではなかったようである。 さらにPierangeliらは、リン脂質が抗プロトロンビン抗体のループスアンチコアグラント機能にとって重要である可能性を観察している。
市川らの分子的研究により、β2-糖タンパク質Iはリン脂質の存在下で他の暗号エピトープを露出させると示唆されている . さらに、リン脂質がβ2-糖タンパク質Iのコンフォメーションを変化させるという証拠が、分光学的研究によってもたらされた。 カルジオリピンは無水および水中で六角形の結晶格子を形成し、β2-糖タンパク質Iは精製状態で46%のβプリーツシート構造を持つが、両者は結合すると大きく変化した。 β2-糖タンパク質Iの場合、βプリーツシート構造は46%から23%に減少する。
従って、リン脂質は抗凝固タンパク質と自己抗体の相互作用に内在し、少なくともいくつかのこれらのタンパク質を固定し表面密度を高め、その止血または抗凝固機能および病的抗体の結合能力の両方に重要であると考えられる方法で、そのコンフォメーションを変化させていることが明らかであるように思われる。 従って、様々な病態や免疫活性化によって形成された異なるリン脂質膜の環境が、抗リン脂質抗体の病原性に大きな影響を与える可能性がある。 例えば、リン脂質中の脂肪酸鎖の構造と長さは、抗リン脂質ELISA法におけるヒト血清の結合に重要な役割を果たすかもしれない。自己抗体はC18：1ホスファチジルグリセロールに優先的に結合し、抗リン脂質抗体はホスファチジルエタノールアミンとは対照的にリゾホスファチジルエタノールアミンに親和性が高くなるかもしれない. 抗リン脂質抗体を含む臨床血清のリン脂質嗜好性の複雑さを示唆する多くの文献は、これらの抗体の多くは、これらのリン脂質特異性の文脈で、特定の脂質結合タンパク質を認識しているという進化した認識と結びついたままである。 RauchとJanoffによってレビューされたように、キノゲンがホスファチジルエタノールアミンへの抗体の結合を媒介すること、プロトロンビン、および/またはアネキシンVが抗ホスファチジルセリン抗体の標的であるかもしれないこと、赤血球結合抗体はホスファチジルコリンを含む複合抗原を認識するかもしれないという予備データ.
抗リン脂質血清の結合を促進する最も一般的な有利な背景である陰イオン性リン脂質は、通常は細胞膜の細胞外表面には存在しませんが、細胞の活性化またはプログラムされた細胞死（アポトーシス）の初期段階のいずれかで内葉から外葉へと再分配されます . 抗リン脂質抗体は、β2-糖タンパク質I依存的に、生細胞ではなくアポトーシスの胸腺細胞に特異的に結合することが分かっている。 さらに、ホスファチジルセリンのような露出した負電荷のリン脂質は、強力な表面凝固促進剤であると考えられている。この現象は、ホスファチジルセリン結合タンパク質であるアネキシンVが、アポトーシスブレブの外表面に直接結合することで改善されることが分かっている
この発見は、抗リン脂質抗体がリン脂質結合タンパク質のみを認識するか、リン脂質単独または複合抗原に結合するかに関する論争が偽りのものかもしれないと示唆している。 生体内では、凝固調節タンパク質はリン脂質と密接な関係にあり、止血イベント時には強固に複合化されている可能性がある。 リン脂質と近接する補酵素タンパク質のどちらかを標的とすることで、異種抗体は凝固における両者の役割を阻害する可能性がある＜6576＞。