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La tinción de Gram, el procedimiento de tinción más utilizado en bacteriología, es un procedimiento de tinción complejo y diferencial. A través de una serie de pasos de tinción y decoloración, los organismos del dominio Bacteria se diferencian según la composición de la pared celular. Las bacterias Gram positivas tienen paredes celulares que contienen gruesas capas de peptidoglicano (90% de la pared celular). Éstas se tiñen de color púrpura. Las bacterias Gram negativas tienen paredes con capas finas de peptidoglicano (10% de la pared) y un alto contenido en lípidos. Se tiñen de rosa. Este procedimiento de tinción no se utiliza para las arqueas o los eucariotas, ya que ambos carecen de peptidoglicano. La realización de la tinción de Gram en cualquier muestra requiere cuatro pasos básicos que incluyen la aplicación de una tinción primaria (cristal violeta) a un frotis fijado con calor, seguida de la adición de un mordiente (yodo de Gram), la decoloración rápida con alcohol, acetona o una mezcla de alcohol y acetona y, por último, la contratinción con safranina.
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