Se considera que un resultado positivo de una prueba serológica, la evidencia de antígeno viral en el tejido mediante inmunohistoquímica o la presencia de secuencias amplificables de ARN viral en la sangre o el tejido, con antecedentes compatibles de SPH, son diagnósticos de SPH.
Pruebas serológicas
En el momento del brote de 1993 en la zona de Four Corners, los anticuerpos de reacción cruzada con los hantavirus previamente conocidos (por ejemplo, Hantaan, Seúl, Puumala y Prospect Hill) se encontraron en los sueros en fase aguda y de convalecencia de algunos de los pacientes iniciales de HPS. Desde entonces, se han desarrollado pruebas basadas en antígenos virales específicos del SNV y ahora se utilizan ampliamente para el diagnóstico rutinario del SPH. Los CDC utilizan un ensayo inmunoenzimático (ELISA) para detectar anticuerpos IgM contra el SNV y para diagnosticar infecciones agudas por otros hantavirus. Este ensayo también está disponible en algunos laboratorios estatales de salud.
Se utiliza una prueba de IgG junto con la prueba de captura de IgM. Los sueros en fase aguda y de convalecencia deben reflejar un aumento de cuatro veces en el título de anticuerpos IgG o la presencia de IgM en los sueros en fase aguda para diagnosticar la enfermedad por hantavirus. Tenga en cuenta que el suero de fase aguda enviado como muestra de diagnóstico inicial puede no tener todavía IgG. El anticuerpo IgG es de larga duración, y los sueros de los pacientes identificados retrospectivamente parecen haber conservado el anticuerpo durante muchos años. Por lo tanto, la prueba ELISA de IgG del SNV se ha utilizado en investigaciones serológicas de la epidemiología de la enfermedad y parece ser apropiada para este propósito. Las investigaciones de poblaciones seleccionadas utilizando este ensayo han confirmado que las infecciones con el virus no son comunes y que las infecciones leves o inaparentes son raras.
También se ha desarrollado un ensayo de Western blot utilizando antígenos recombinantes y conjugados específicos de isotipo para la diferenciación IgM-IgG y sus resultados están generalmente de acuerdo con los del formato de captura de IgM.
También se utiliza un ensayo rápido de tira de inmunoblot (RIBA), un prototipo de ensayo en investigación para identificar anticuerpos séricos contra proteínas recombinantes y péptidos específicos para el SNV y otros hantavirus.
La confirmación serológica de las infecciones por hantavirus se ha realizado tradicionalmente con ensayos de placa neutralizante, que se han descrito recientemente para el SNV. Sin embargo, estos ensayos específicos tampoco están disponibles comercialmente.
Aislamiento
El aislamiento de los hantavirus (véase más adelante) de fuentes humanas es difícil, y los virus causantes del SPH no parecen ser una excepción a esta regla. Hasta la fecha, no se han recuperado aislamientos de virus similares al SNV en seres humanos y, por lo tanto, el aislamiento del virus no se tiene en cuenta a efectos de diagnóstico.
Inmunohistoquímica (IHC)
La prueba IHC de tejidos fijados en formol con anticuerpos monoclonales y policlonales específicos puede utilizarse para detectar antígenos de hantavirus y ha demostrado ser un método sensible para la confirmación en laboratorio de las infecciones por hantavirus. La IHC tiene un papel importante en el diagnóstico del SPH en pacientes de los que no se dispone de muestras de suero y tejidos congelados para las pruebas de diagnóstico y en la evaluación retrospectiva de la prevalencia de la enfermedad en una región geográfica definida.