Se estima que el 90% de todos los carcinógenos son también mutágenos. La prueba de Ames, desarrollada originalmente por el Dr. Bruce Ames y sus colegas, utiliza bacterias modificadas sensibles a los agentes mutagénicos para evaluar la capacidad de un compuesto de causar mutaciones directas en el ADN. Los eventos mutacionales inversos hacen que las bacterias vuelvan a un estado protrófico y crezcan en medios deficientes en nutrientes seleccionados. Esta prueba se denomina ensayo de mutagenicidad de Salmonella Ames/microsoma (prueba de Salmonella; prueba de Ames), y se ha utilizado para confirmar los mecanismos mutagénicos de varios carcinógenos conocidos, así como para descubrir nuevos carcinógenos previamente desconocidos en productos de consumo. La Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) utiliza ahora la prueba de Ames para analizar muchas sustancias químicas de forma rápida y económica. Las pocas sustancias químicas que parecen ser mutagénicas mediante el ensayo de Ames se someten a más pruebas en animales para evaluar su potencia cancerígena.
Se han desarrollado muchas cepas de prueba diferentes compuestas por Salmonella typhimurium y Escherichia coli para su uso en el ensayo de Ames que detectan tipos de mutación específicos, como el par de bases o el cambio de marco, y son más sensibles para agentes específicos. Las mejoras del ensayo han aumentado la susceptibilidad de las cepas a la entrada de compuestos, han introducido mecanismos deficientes de reparación del ADN y han conferido capacidades de bioactivación metabólica. El método original de la placa de vertido también ha sido sustituido en gran medida por un método de ensayo de fluctuación más reciente que emplea un paso de exposición líquida, incubación y reversión y utiliza un indicador de pH colorimétrico para demostrar el crecimiento bacteriano. Estas mejoras se han combinado para reducir los límites de detección, aumentar la amplitud de los compuestos que pueden detectarse, permitir adaptaciones de alto rendimiento y hacer que el ensayo sea más relevante desde el punto de vista biológico para los seres humanos. EBPI ofrece muchas opciones de ensayos diferentes para cada uno de los tres métodos del kit descritos a continuación para asegurar el éxito de su análisis mutacional.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Contiene 1 bacteria, reactivos, controles y plásticos)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Contiene 2 reactivos bacterianos, controles y plásticos)
5051S9 Enzimas de activación (diseñado para la prueba de Ames)
Una versión en microplaca de la tradicional prueba de Ames en «placa de vertido». El kit Muta-ChromoPlateTM es sensible y fácil de usar. Se utiliza habitualmente para detectar el potencial mutagénico de sustancias químicas individuales o de mezclas de sustancias químicas en el agua, las aguas residuales, los sedimentos, los extractos acuosos del aire, las nuevas sustancias químicas, los alimentos, los cosméticos, los productos farmacéuticos y cualquier otro material que pueda ponerse en solución acuosa o en microsuspensión, de forma que pueda ser absorbido por la cepa de ensayo.
6041 Ames-384 ISO Basic Kit (Contiene 1 bacteria, reactivos, controles y plásticos)
6041-2BS Ames-384 ISO Bacterial Strain Kit (Contiene 2 reactivos bacterianos, controles y plásticos)
El kit Ames ISO Basic es una versión de ensayo de fluctuación del conocido «Test de Ames» que utiliza un formato de exposición de muestras de 48 pocillos en una microplaca de 384 pocillos para reducir el uso de reactivos y plásticos. El procedimiento Ames ISO se desarrolló para analizar materiales mutagénicos en una variedad de fuentes como muestras de aire y agua del medio ambiente, alimentos, productos de cuidado personal y efluentes industriales mediante el ensayo de fluctuación, que es una variación del tradicional «Test de Ames».
El método Ames ISO proporciona a los investigadores un método de ensayo fiable que es fácil de preparar y ejecutar, apto para muestras en solución o suspensión acuosa y produce un punto final colorimétrico fácilmente detectable después de 2-3 días de incubación a 37 °C.
5041 Ames Modified ISO Basic Kit (Contiene 1 cepa bacteriana, reactivos, controles y plásticos)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (Contiene 2 reactivos bacterianos, controles y plásticos)
Este método de ensayo Ames es una modificación del ensayo de fluctuación Ames ISO. Las cepas bacterianas se exponen previamente a diferentes concentraciones de los compuestos mutagénicos con un medio de crecimiento en suspensión durante 100 minutos. Cada dilución se realiza por triplicado.
Las muestras se transfieren entonces, se mezclan con una solución de reversión y se chapan en una placa de 96 pocillos mientras se utiliza un formato de evaluación de 48 pocillos. Las muestras se incuban durante 2-3 días y el número de colonias revertientes (pocillos individuales) se cuenta mediante análisis colorimétrico.
Qué prueba de Ames es mejor para mi investigación
Prueba de Ames en placa cromática
- Ideal para la evaluación directa de muestras ambientales
- Usos educativos para proyectos de aula (fácil de preformar)
- Formato de 96 pozos en placas de 96 pozos. Más puntos finales/muestra pueden mejorar la significación
- La exposición bacteriana se produce a lo largo de todo el ensayo
- Extremadamente fácil de usar con mínimos pasos necesarios para obtener resultados
- Excelente para analizar materiales volátiles
- No se requieren pasos de preconcentración, se utilizan grandes volúmenes de muestra
- Resultados más sensibles en comparación con los ensayos de incorporación en placa
Pruebas ISO e ISO Ames modificadas
- Ideal para descubrimientos farmacéuticos y de nuevas moléculas
- El formato de 48 pocillos en placas de 96 o 384 pocillos reduce las placas necesarias para el desarrollo de resultados
- ¡Método de alto rendimiento! Se pueden analizar rápidamente muchas muestras o niveles de dilución
- Se requieren tamaños de muestra más pequeños
- La concentración bacteriana se comprueba por densidad óptica (garantiza la fase de crecimiento logarítmico)
- Se necesitan menos plásticos y reactivos, menos desechos
- La cuantificación es sencilla y la puntuación del ensayo es rápida y fácil
- El ensayo es más sensible que el ensayo de incorporación en placa
- Aprovecha el período de preperíodo de exposición para mejorar la captación bacteriana
- Concentración de exposición más consistente durante las fases de crecimiento auxotrófico
Kits de prueba Ames
EBPI ofrece una amplia variedad de métodos de prueba Ames para la investigación y el desarrollo, muestreo ambiental y proyectos de descubrimiento de fármacos.
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Muta-ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Modified Ames ISO Test |
