Diagnostika

Pozitivní výsledek sérologického testu, průkaz virového antigenu ve tkáni pomocí imunohistochemie nebo přítomnost amplifikovatelných sekvencí virové RNA v krvi nebo tkáni se slučitelnou anamnézou HPS se považuje za diagnostiku HPS.

Serologické testy

V době vypuknutí epidemie v roce 1993 v oblasti Four Corners byly zjištěny zkříženě reagující protilátky proti dříve známým hantavirům (např, Hantaan, Seoul, Puumala a Prospect Hill viry) byly nalezeny v sérech některých prvních pacientů s HPS v akutní a rekonvalescentní fázi. Od té doby byly vyvinuty testy založené na specifických virových antigenech SNV, které se nyní běžně používají pro rutinní diagnostiku HPS. CDC používá enzymatický imunosorbční test (ELISA) k detekci IgM protilátek proti SNV a k diagnostice akutních infekcí jinými hantaviry. Tento test je k dispozici také v některých státních zdravotnických laboratořích.

V kombinaci s testem na zachycení IgM se používá test na IgG. Séra v akutní a rekonvalescentní fázi by měla odrážet čtyřnásobné zvýšení titru protilátek IgG nebo přítomnost IgM v sérech v akutní fázi, aby bylo možné diagnostikovat hantavirové onemocnění. Všimněte si, že sérum akutní fáze zaslané jako počáteční diagnostický vzorek ještě nemusí mít IgG. Protilátky IgG jsou dlouhodobé a zdá se, že séra zpětně identifikovaných pacientů si uchovávají protilátky po mnoho let. Test SNV IgG ELISA byl proto použit při sérologickém vyšetřování epidemiologie onemocnění a zdá se, že je pro tento účel vhodný. Vyšetření vybraných populací pomocí tohoto testu potvrdilo, že infekce virem nejsou běžné a že mírné nebo nevýrazné infekce jsou vzácné.

Vyvinut byl také test Western blot využívající rekombinantní antigeny a izotypově specifické konjugáty pro rozlišení IgM-IgG a jeho výsledky jsou obecně ve shodě s výsledky formátu IgM-capture.

Také se používá rychlý imunoblotový proužkový test (RIBA), zkoumaný prototyp testu k identifikaci sérových protilátek proti rekombinantním proteinům a peptidům specifickým pro SNV a jiné hantaviry.

Serologické potvrzení hantavirových infekcí se tradičně provádí pomocí neutralizačních plakových testů, které byly nedávno popsány pro SNV. Tyto specifické testy však rovněž nejsou komerčně dostupné.

Izolace

Izolace hantavirů (viz níže) z lidských zdrojů je obtížná a zdá se, že viry způsobující HPS nejsou z tohoto pravidla výjimkou. K dnešnímu dni nebyly z lidí získány žádné izoláty virů podobných SNV, a proto izolace virů nepřichází pro diagnostické účely v úvahu.

Imunohistochemie (IHC)

IHC vyšetření tkání fixovaných ve formalínu specifickými monoklonálními a polyklonálními protilátkami lze použít k detekci antigenů hantavirů a ukázalo se jako citlivá metoda pro laboratorní potvrzení hantavirových infekcí. IHC má důležitou úlohu při diagnostice HPS u pacientů, u nichž nejsou k dispozici vzorky séra a zmrazené tkáně pro diagnostické testování, a při retrospektivním hodnocení prevalence onemocnění ve vymezeném geografickém regionu.

.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.