Schätzungsweise 90 % aller Karzinogene sind auch Mutagene. Beim Ames-Test, der ursprünglich von Dr. Bruce Ames und seinen Kollegen entwickelt wurde, werden modifizierte Bakterien verwendet, die für mutagene Stoffe empfindlich sind, um die Fähigkeit einer Verbindung zu bewerten, direkte DNA-Mutationen zu verursachen. Umgekehrte Mutationsereignisse führen dazu, dass die Bakterien in einen protrophen Zustand zurückkehren und auf Medien wachsen, die einen Mangel an ausgewählten Nährstoffen aufweisen. Dieser Test wird als Salmonella-Ames-Salmonella/Mikrosomen-Mutagenitätstest (Salmonella-Test; Ames-Test) bezeichnet und wurde zur Bestätigung der mutagenen Mechanismen mehrerer bekannter Karzinogene sowie zur Entdeckung neuer, bisher unbekannter Karzinogene in Verbraucherprodukten verwendet. Die Lebensmittel- und Arzneimittelbehörde (FDA) verwendet den Ames-Test inzwischen für ein schnelles und kostengünstiges Screening vieler Chemikalien. Die wenigen Chemikalien, die sich im Ames-Test als mutagen erweisen, werden im Tierversuch weiter getestet, um ihre karzinogene Potenz zu ermitteln.
Für den Ames-Test wurden viele verschiedene Testerstämme aus Salmonella typhimurium und Escherichia coli entwickelt, die spezifische Mutationstypen wie Basenpaar- oder Frameshift-Mutationen nachweisen und empfindlicher für bestimmte Stoffe sind. Durch Verbesserungen des Tests wurde die Anfälligkeit der Stämme für das Eindringen von Substanzen erhöht, mangelhafte DNA-Reparaturmechanismen eingeführt und die Fähigkeit zur metabolischen Bioaktivierung verliehen. Die ursprüngliche Plattenmethode wurde weitgehend durch eine neuere Fluktuationsmethode ersetzt, bei der eine Flüssigkeitsexposition, eine Inkubation und ein Reversionsschritt vorgesehen sind und ein kolorimetrischer pH-Indikator zum Nachweis des Bakterienwachstums verwendet wird. Diese Verbesserungen wurden kombiniert, um die Nachweisgrenzen zu senken, die Bandbreite der nachweisbaren Verbindungen zu erhöhen, Anpassungen im Hochdurchsatzverfahren zu ermöglichen und den Assay biologisch relevanter für den Menschen zu machen. EBPI bietet viele verschiedene Assay-Optionen für jede der drei unten beschriebenen Kit-Methoden, um den Erfolg Ihrer Mutationsanalyse zu gewährleisten.
Muta-ChromoPlate™ Basic Kit
5051 Muta-ChromoPlate Basic Kit (Enthält 1 Bakterium, Reagenzien, Kontrollen und Kunststoff)
B5051 Muta-ChromoPlate Bacterial Strain Kit (Enthält 2 Bakterien, Kontrollen und Kunststoffe)
5051S9 Aktivierungsenzyme (für den Ames-Test)
Eine Mikrotiterplattenversion des traditionellen „Schüttplatten“-Ames-Tests. Das Muta-ChromoPlateTM Kit ist empfindlich und benutzerfreundlich. Er wird üblicherweise zum Nachweis des mutagenen Potenzials einzelner Chemikalien oder Chemikalienmischungen in Wasser, Abwasser, Sedimenten, wässrigen Luftextrakten, neuen Chemikalien, Lebensmitteln, Kosmetika, Arzneimitteln und jedem anderen Material verwendet, das in wässrige Lösung oder Mikrosuspension gebracht werden kann, so dass es vom Teststamm aufgenommen werden kann.
6041 Ames-384 ISO Basic Kit (Enthält 1 Bakterium, Reagenzien, Kontrollen und Kunststoffe)
6041-2BS Ames-384 ISO Bacterial Strain Kit (Enthält 2 Bakterienstämme, Reagenzien, Kontrollen und Plastik)
Das Ames-ISO-Basiskit ist eine Fluktuationsassay-Variante des bekannten „Ames-Tests“, bei dem ein 48-Well-Probenexpositionsformat auf einer 384-Well-Mikroplatte verwendet wird, um den Reagenzien- und Plastikverbrauch zu reduzieren. Das Ames-ISO-Verfahren wurde entwickelt, um mutagene Stoffe in einer Vielzahl von Quellen wie Luft- und Wasserproben, Lebensmitteln, Körperpflegeprodukten und Industrieabwässern mit Hilfe des Fluktuationstests zu testen, der eine Variante des traditionellen „Ames-Tests“ ist.
Die Ames-ISO-Methode bietet Forschern eine zuverlässige Testmethode, die einfach einzurichten und durchzuführen ist, für Proben in wässriger Lösung oder Suspension geeignet ist und einen leicht nachweisbaren kolorimetrischen Endpunkt nach 2-3 Tagen Inkubation bei 37 °C erzeugt.
5041 Ames Modified ISO Basic Kit (Enthält 1 Bakterium, Reagenzien, Kontrollen und Kunststoffe)
5041-2BS Ames Modified ISO Bacterial Strain Kit (Enthält 2 Bakterienstämme, Reagenzien, Kontrollen und Kunststoffe)
Dieses Ames-Testverfahren ist eine Modifikation des Ames-ISO-Fluktuationstests. Bakterienstämme werden unterschiedlichen Konzentrationen der mutagenen Verbindungen mit einem Wachstumsmedium in Suspension für 100 Minuten ausgesetzt. Jede Verdünnung wird in dreifacher Ausführung durchgeführt.
Die Proben werden dann transferiert, mit einer Reversionslösung gemischt und auf eine 96-Well-Platte plattiert, wobei ein 48-Well-Auswerteformat verwendet wird. Die Proben werden 2-3 Tage lang bebrütet, und die Anzahl der Revertantenkolonien (einzelne Vertiefungen) wird durch kolorimetrische Analyse gezählt.
Welcher Ames-Test eignet sich am besten für meine Forschung
Muta-ChromoPlate Ames Test
- Ideal für die direkte Bewertung von Umweltproben
- Einsatz in der Lehre für Projekte im Klassenzimmer (leicht durchzuführen)
- 96 Well Format auf 96 Well Platten. Mehr Endpunkte/Probe können die Signifikanz verbessern
- Bakterielle Exposition erfolgt während des gesamten Assays
- Extrem benutzerfreundlich mit minimalen Schritten, die erforderlich sind, um Ergebnisse zu erhalten
- Exzellent zum Testen flüchtiger Materialien
- Keine Vorkonzentrationsschritte erforderlich, große Probenmengen werden verwendet
- empfindlichere Ergebnisse im Vergleich zu Platteninkorporationstests
ISO- und modifizierte ISO-Ames-Tests
- Ideal für pharmazeutische und neuartige Molekülentdeckungen
- 48-Well-Format in 96- oder 384-Well-Platten reduziert die für die Ergebnisentwicklung erforderlichen Platten
- Hohe Durchsatzmethode! Viele Proben oder Verdünnungsstufen können schnell getestet werden
- Kleinerer Probenumfang erforderlich
- Bakterienkonzentration wird anhand der optischen Dichte überprüft (gewährleistet log-Wachstumsphase)
- Reduzierter Bedarf an Kunststoffen und Reagenzien, weniger Entsorgung
- Die Quantifizierung ist einfach und die Testauswertung ist schnell und leicht
- Der Test ist empfindlicher als der Platteninkorporationstest
- Nutzt dieExpositionszeit zur Verbesserung der bakteriellen Aufnahme
- Konsistentere Expositionskonzentration während auxotropher Wachstumsphasen
Ames-Testkits
EBPI bietet eine Vielzahl von Ames-Testmethoden für Forschung und Entwicklung, Umweltprobenahmen und Projekte zur Arzneimittelentdeckung.
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Muta-ChromoPlate Kit |
Ames ISO Test 384 Well Format |
Modifizierter Ames ISO Test |
